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植物体内硝态氮含量的测定教师提前烧水，讲解完内容后打开分光光度计开关2学生进教室先做硝态氮提取，后讲解实验内容。作为施肥指标：植物体内硝态氮含量可以反映土壤氮素供应情况。包括：硝态氮、亚硝态氮。鉴定蔬菜及其加工品质：蔬菜类作物特别是叶菜和根菜中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制过程中可转化为亚硝酸盐而危害健康。因此，硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要品质指标。一测定意义：人体摄入的硝态氮81.2％来自蔬菜，当人摄取得硝酸盐量较大时，体内的NO3－还原成NO2－进入血液，将血液中的血红素变成高铁蛋白，引起肌体中毒。NO2－还可以间接与次级胺结合形成强制癌物质－亚硝胺。01咸菜的腌制初期咸菜内会大量积累硝酸盐，硝酸盐含量升高数倍或数十倍，当咸菜腌制成熟后硝酸盐含量减少（很低），所以，咸菜没有腌制完成之前，不要食用。02青菜放置时间延长一天，体内的硝酸盐含量会不断增加，购买蔬菜后及时食用，不要放置时间过长，减少硝酸盐的积累。03二测定原理：水杨酸法硝基水杨酸在碱性条件下（pH12）呈黄色，最大吸收峰的波长为410nm，在一定范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。在浓酸条件下，NO3―与水杨酸反应，生成硝基水杨酸。小白菜：绿叶片、叶柄两个小组合作，一个小组测叶片，另一个小组测定叶柄。二者必须是同几株上的材料。所用仪器、试剂已备好在实验台上三、实验材料样品中硝酸盐的提取和测定标准曲线的制作（学生不做）C(μg/ml)=110.99D410+6.30(S22P型分光光度计)12四、操作步骤：冲洗残渣，定容材料剪碎、混匀，精确称取材料2g3次重复加无离子水10ml沸水浴中提取30min（最好2次，受实验时间的限制，本次实验提取1次）塞子封口，橡皮筋捆扎在一起自来水冷却，过滤到25ml容量瓶同几株小白菜（叶片或叶柄）硝酸盐的提取样品液的测定比色空白试管冷却比色（410nm）加5%水杨酸-硫酸0.4ml（室温放置20min）加9.5ml8%NaOH加0.1ml蒸水硝酸盐的测定4支试管各加0.1ml样品液3样品试管式中：C－标准方程计算得NO3-－N浓度V—提取样品液总量W—样品鲜重C×VNO3-﹣N含量(μg/g)=W3结果计算：04030102实验中使用强酸、强碱，一定要注意安全，防止倒在实验台、地面、仪器内，防止撒到衣物上，如果发生意外及时用水冲洗和擦洗。各个小组使用的试管自己洗刷一遍，防止前一个班使用后洗刷不干净，重复间误差较大。吸取0.1ml的样品液一定要准确，溶液加到底部，否则影响到结果的重复性。两组合作进行不同部位的测定，比色测定时必须用同一台分光光度计。注意事项**
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