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生物医药实验操作考核题

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1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。

2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。

一、选择题

1.生物医药实验中，以下哪种方法是用于分离DNA和蛋白质？

A.盐析

B.离心

C.沉淀

D.电泳

2.以下哪种物质用于质粒的提取？

A.琼脂糖凝胶

B.生理盐水

C.异丙醇

D.NaOH

3.PCR实验中，哪个步骤是用于扩增目标DNA序列？

A.变性

B.退火

C.合成

D.解旋

4.以下哪种仪器常用于观察细胞形态？

A.显微镜

B.紫外分光光度计

C.荧光定量PCR仪

D.生物质能谱仪

5.以下哪种方法是用于检测细胞内蛋白质表达？

A.Westernblot

B.免疫荧光

C.RTPCR

D.Southernblot

答案及解题思路：

1.答案：D.电泳

解题思路：电泳是利用带电粒子在电场中移动的速度差异，将混合物中的不同分子按大小或电荷分离。在生物医药实验中，电泳常用于分离DNA和蛋白质，因为DNA和蛋白质在电场中的迁移速度不同。

2.答案：C.异丙醇

解题思路：质粒提取过程中，异丙醇常用于沉淀质粒DNA。当加入异丙醇后，质粒DNA由于疏水性而沉淀，便于后续的纯化步骤。

3.答案：B.退火

解题思路：PCR（聚合酶链反应）中，退火步骤是指将双链DNA模板加热至一定温度，使双链解开，为后续的DNA合成提供单链模板。因此，退火步骤是用于扩增目标DNA序列的关键步骤。

4.答案：A.显微镜

解题思路：显微镜是观察细胞形态的常用仪器。通过放大细胞图像，研究人员可以详细观察细胞的形态、结构及其内部结构。

5.答案：A.Westernblot

解题思路：Westernblot是一种检测细胞内蛋白质表达的方法。通过特异性抗体与目标蛋白质结合，然后在电泳分离后，利用二抗与一抗结合，通过化学发光或荧光检测系统检测蛋白质的表达水平。

二、填空题

1.生物医药实验中，常用的核酸提取方法是__________________。

答案：酚氯仿法

解题思路：酚氯仿法是核酸提取中常用的方法，通过使用酚和氯仿将细胞中的蛋白质和DNA分离，再通过离心和洗涤得到纯化的DNA。

2.PCR实验中，变性、退火、合成的温度分别是__________________。

答案：变性9498℃，退火5065℃，合成7075℃

解题思路：PCR（聚合酶链反应）中，变性阶段需要高温使双链DNA解链，退火阶段需要适当温度使引物与模板DNA结合，合成阶段需要温度适宜以进行DNA的合成。

3.Westernblot实验中，转移膜常用的缓冲液是__________________。

答案：转移缓冲液

解题思路：Westernblot实验中，转移膜常用的缓冲液含有Tris、甘氨酸和甲醇等成分，用于促进蛋白质从凝胶转移到硝酸纤维素膜上。

4.细胞培养实验中，__________________用于消毒细胞培养器皿。

答案：高压蒸汽灭菌法

解题思路：高压蒸汽灭菌法是细胞培养实验中用于消毒器皿的标准方法，通过高温高压杀灭可能存在的微生物。

5.ELISA实验中，洗涤液常用的成分是__________________。

答案：磷酸盐缓冲溶液（PBS）

解题思路：ELISA实验中的洗涤液通常使用磷酸盐缓冲溶液，这是因为PBS能提供适当的pH环境，同时有助于清洗去除未结合的酶标记物。

三、判断题

1.PCR实验中，变性、退火、合成的温度是固定的。

答案：错误

解题思路：在PCR实验中，变性、退火和合成的温度并非固定。这三个步骤的温度根据所使用的引物、DNA模板的长度和类型、以及扩增目的等不同因素而有所不同。通常，变性温度设置在9598℃之间，退火温度根据引物与模板的结合特性和Tm值设定，合成温度一般在6072℃之间。

2.紫外分光光度计可以用于测定DNA的浓度。

答案：正确

解题思路：紫外分光光度计可以用于测定DNA的浓度。通过测定在特定波长（通常为260nm）下的吸光度，根据BeerLambert定律计算出DNA的浓度。这种方法简便、快速，是实验室常用的DNA定量方法。

3.Westernblot实验中，一抗和二抗都是特异性的。

答案：正确

解题思路：Westernblot实验中，一抗和二抗都是特异性的。一抗通常针对目的蛋白的特异性抗原表位，二抗则与一抗结合，通常使用酶标二抗，以便于后续的显色反应。特异性结合是保证实验结果准确性的关键。

4.细胞培养实验中，