男科学实验室诊断进展.ppt

六、精浆生化的检测精浆中的一些生化标志可反映男性附属性腺、附睾及睾丸生精功能等，有利于综合评价不育的发病原因和机制。例如，柠檬酸、锌、镁、谷氨酰转肽酶和酸性磷酸酶可反映前列腺功能，其中的酸性磷酸酶检测已成为男科实验室的常规检查，常用磷酸苯二钠法；果糖与前列腺素可反映精囊腺功能，常用间苯二酚法检测果糖；游离左旋肉毒碱、甘油磷酸胆碱和α-葡糖苷酶可反映附睾功能。第30页，共52页，星期日，2025年，2月5日精浆总α-葡糖苷酶检测中应注意3点离心速度不同，精浆总α-葡糖苷酶活性有所差异精浆总α-葡糖苷酶活性与禁欲时间的长短密切相关精浆总α-葡糖苷酶活性的检测应进行质量控制第31页，共52页，星期日，2025年，2月5日不同速度离心后的精浆中α葡糖苷酶水平第32页，共52页，星期日，2025年，2月5日禁欲时间对精浆α葡糖苷酶的影响Abstinencetime(day)nAlpha-glucosidase(U/ml)Seminalplasma(1000gfor10min)Seminalplasma(3000gfor15min)2~31236.47±12.2434.04±11.224~51649.62±16.86*47.73±17.37*6~71451.14±19.76*46.76±17.70*8968.70±14.10*#△63.86±13.63*#△第33页，共52页，星期日，2025年，2月5日精浆果糖检测中应注意4点：①果糖标准液配制后应放置2周后使用，而使用2周后出现吸光度降低时应立即更换新的果糖标准液②离心速度不同精浆果糖浓度稍有差异③精液液化后应立即离心将精子和精浆分离，否则会影响精浆果糖检测结果④精浆果糖测定中应引入质量控制体系第34页，共52页，星期日，2025年，2月5日果糖标准液吸光度的监测第35页，共52页，星期日，2025年，2月5日精液放置时间对果糖浓度的影响GroupnFructose(mmol/L)0h4815.73±6.562h4815.07±6.56a4h4814.73±6.51b,c第36页，共52页，星期日，2025年，2月5日精浆稀释后放置时间对酸性磷酸酶活性的影响随机选取10例精浆，1∶10000稀释后立即检测ACP活性或稀释后放置30min再次检测ACP活性，两者比较有极显著性差异（t＝3.770，P＝0.001）。第37页，共52页，星期日，2025年，2月5日抑制素B被认为是男性精子发生的血清标志物。成年男性血清中维持可检测的抑制素B水平需要生精细胞的存在，唯支持细胞综合征（SCO）男性血清抑制素B水平极低。Brugo-Olmedo等认为血清抑制素B在预言非阻塞性无精子症病人的睾丸精子存在时比血清FSH更准确。除此之外，抑制素B还可用于儿童隐睾、性早熟的诊断，监测放、化疗对男性生精功能的损伤等。目前，抑制素B的检测通常使用双抗体夹心ELISA法。第38页，共52页，星期日，2025年，2月5日七、精浆细胞因子的检测精浆细胞因子由男性泌尿生殖道内的各种细胞分泌，包括转化生长因子（TGF）、表皮生长因子（EGF）、肿瘤坏死因子（TNF）、各种白细胞介素（IL）及某些可溶性受体等。目前认为，与男性不育有关的细胞因子主要有IL-6和IL-8，不育病人精浆中IL-6和IL-8水平明显高于生育力正常的男性。测定IL-6和IL-8的方法有：生物学方法、分子生物学方法和免疫学方法，以免疫学方法多用，尤以ELISA和RIA常用。第39页，共52页，星期日，2025年，2月5日八、精子发生相关基因的检测与精子发生相关的基因很多，无精子病人的基因缺失均发生于Y染色体的长臂,主要位于Yq11.23中，而且并非是单一基因，可能含有整个基因大家族。1996年，Vogt等人在更大范围对无精子、少精子病人进行了研究，认为在3个区域均存在AZF，分别为AZFa，AZFb，AZFc，对这些病人睾丸活检发现，睾丸的病理改变与AZF的缺失部位有显著相关性。AZFa：Sy84,Sy86AZFb：Sy124，Sy127，Sy132,Sy134AZFc：Sy152，Sy157，Sy239，Sy242，Sy254，Sy255第40页，共52页，星期日，2025年，2月5日AZF检测：SRY存在于