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小心处理：高导电蛋白样品的Zeta电位测量

相关领域：Litesizer™500，Univette样品池，电泳光散射（ELS），cmPALS技术，蛋白模式，溶菌酶

蛋白质最常在体液或等渗缓冲液中再悬浮。然而，在这种高导电性溶剂上用电泳光散射（ELS）

测量zeta电位可能会导致产生过量热量，进而造成样品降解和电极损伤。本文中，我们使用稳定

且可重复使用的Univette样品池和Litesizer™500来测量溶解在等渗缓冲液中的标准蛋白溶菌酶的

zeta电位。由于cmPALS专利技术和蛋白模式，该模式可以使测量过程短暂中断，使样品冷却下

来，我们能够在不造成电极损伤的情况下获得高重复性的zeta电位测量结果。

用户可以激活一个称为“蛋白模式”的软件功能，它会

在测量zeta电位时引入短暂的中断，从而使样品冷却

下来。

Univette是一种可重复使用的样品池，可用于在高导电

性或有机溶剂中测量zeta电位，它足够坚固，可以承

受这种条件，并且不会造成电极损伤（4）。

本文我们演示了Litesizer™500和Univette的联用性能

，即使用Kalliope™的蛋白模式来测量标准蛋白溶菌酶

在高导电性溶剂中的zeta电位。

2实验方法

用卵清蛋白（Sigma-Aldrich）制备了两种不同的溶菌

酶溶液：

0.1mg/mL，溶于10mMBisTris缓冲液（

1简介CarlRoth）和50mMNaCl（J.T.Baker）1：

1的混合物中。

1.0mg/mL，溶于磷酸盐缓冲液（PBS，

Zeta电位与粒子间斥力有关，通常表征粒子悬浮液特Sigma-Aldrich）中。

性必需测量zeta电位。虽然很多物质可以溶解或分散

向Univette石英样品池中加入900μL样品。第一次测

在去离子水中，但有些粒子需要分散在高导电性的溶剂

量的平衡时间设置为2分钟，连续测量30秒。每个溶

中才能保持其结构，不会降解。这在生物样品中尤其常

液测试3个独立样本，每个样本重复4次，共测试12

见，因为蛋白质、生物医学聚合物和细胞必须溶解在缓

次。表1总结了测量的输入参数。

冲液或等渗缓冲液中。

利用电泳光散射（ELS）来测量zeta电位，这意味着

在样品上应用了电场。这种测量技术的常见弊端是所谓样品浓度0.1mg/ml1mg/ml

的焦耳热，即电流通