实验2研究生PCR产物鉴定及PCR原理应用.pptxVIP

生化与分子生物学技术周倜中;实验室秩序（时间，物品保管，;实验二apoB基因多态性;带电粒子（胶体颗粒、离子等）在;?实验室中常用到的电泳方法;利用物质的两个差异来分离物质电;琼脂糖是一种天然聚合长链状分子;1.1影响DNA在凝胶中迁移;1.2不同浓度琼脂糖的凝胶分;一、电泳前准备准备内容作用1.;二、制胶步骤注意事项1.称量a;三、上样电泳步骤注意事项1.样;实验材料基因组DNA电泳仪，电;PCR-apoB基因多态性产物;琼脂糖凝胶板的制备（封板、梳子;有关PCR反应PCR反应体系P;有关PCR反应PCR反应条件P;最初的理论描述—Khorana;PCR技术的发明—KaryM;无标题;1983年12月，Mulli;无标题;有关PCR反应94℃变性55℃;94℃55℃37℃;01TaqDNA聚合酶（Th;72℃94℃55℃PCR循环普;PCR技术的发展1988年第一;KaryB.Mullis（;PCR仪的变迁三个水浴锅，用手;变性延伸;94℃5;PCR技术的特点灵敏度高30轮;PCR的应用领域生物学基础研究;PCR技术应用于科学研究基因片;5’015’02BamHI;PCR技术应用于科学研究围绕二;04正常人01临床基因诊断02;地中海贫血遗传疾病的基因诊断;A正常人病人正常病人A’;病原微生物基因1正常人(-;登革病毒的检测;DMD：人类肌营养不良基因A：;PCR-RFLP法：(PCR产;突变A限制性内切酶B;正常突变电泳;个体识别；亲子鉴定01方法：P;01女性02男性03Y引物04;PCR技术应用于法医学鉴定PC;PCR技术应用于法医学鉴定个体;父’父子母亲子;1：Marker2：阳性模板3;PCR-VNTR(Variab;3’VNTR位于该基因3’端下;掌握PCR技术的原理及基本步骤;TaqDNA聚合酶有何特性;不对称PCR反向PCR多重PC;目的：扩增产生特异长度的单链D;高浓度引物低浓度引物;反向PCR(reverse;已知序列未知序列未知序列限制酶;多重PCR（复合PCR）用于检;电泳引DMD：人类肌营养不良基因A：P-PCR（;PCR产物ＰＣＲ标记引物观察;锚定PCR（anchored;cDNA末端核酸转移酶3’GG;PCR固相分析法模板生物素化引;原位聚合酶链式反应（InSt;既往鉴定细胞内特异序列一般采用;操作步骤1.细胞或组织固定：;01逆转录酶02ＤＮＡ聚合酶0;基因01mRNA02蛋白质多肽;琼脂糖凝胶电泳;”荧光定量PCR仪是一种带有激;荧光定量PCR标记方法内掺式染;5’3’5’3’SGExcit;5’3’5’3’SGSGSGS;RQ5’3’5’3’5’3’5;RQExcitationRQQ时在线监控对