DB41T 769-2012 红掌组培苗繁育技术.docxVIP

DB41

河南省地方标准

DB41/T769—2012

红掌组培苗繁育技术

2012-12-18发布2013-02-18实施

河南省质量技术监督局发布

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DB41/T769-2012

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由河南省花卉协会提出并归口。

本标准起草单位：济源市农业科学研究所。

本标准主要起草人：王梅、陈丽、刘星明、李铭、尹国红、牛立平、郝浩浩。

本标准参加起草人：成东梅、张庆社、牛小沛、李冰、汤曙光、田瑞昌、原维梓。

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红掌组培苗繁育技术

1范围

本标准规定了红掌组培苗的培养基准备、外植体选择、接种与培养、炼苗、移栽及成苗标准内容。本标准适用于河南省境内红掌组培苗繁育技术。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4285农药安全使用标准

GB17323-1998瓶装饮用纯净水

中华人民共和国农业部公告第199号（2002）

3培养基准备

3.1培养容器准备

3.1.1培养容器的清洗

3.1.1.1新的培养容器直接放入洗洁精或洗衣粉溶液中浸泡；用过且无污染培养容器先倒掉容器中的

残留物再浸泡；污染的培养容器先按照4.3的要求灭菌后倒掉污染物再浸泡；浸泡时间不低于6h。3.1.1.2洗刷瓶内外残留物，用清水再冲洗3遍～5遍，放入专用框中晾干。

3.1.2接种器械的清洗

3.1.2.1清除接种器械上的残留物，在洗洁精溶液中浸泡数分钟。

3.1.2.2洗刷干净后用清水冲洗3遍～5遍并晾干。

3.1.2.3用棉布或纸包好，按3.3的要求灭菌。

3.2培养基配制

3.2.1母液配制

3.2.1.1MS培养基母液的配制见附录A。

3.2.1.2植物生长物质KT、6-BA用少量0.1mol/L的HCI溶解后用蒸馏水定容，IBA、NAA用少量的95%的酒精或0.1mol/LNaOH溶解后用蒸馏水定容。

3.2.2培养基制作

3.2.2.1依据培养基成分准备好蒸馏水、蔗糖、琼脂和各类母液。

3.2.2.2加定容总量2/3左右的水（水符合GB17323-1998），再加琼脂粉放入锅中加热搅拌使其融

化。

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3.2.2.3琼脂粉融化后，加入蔗糖，搅拌使蔗糖溶解。

3.2.2.4蔗糖溶解后，停止加热，放入吸取的各类母液，并充分搅拌。

3.2.2.5搅拌均匀后，加入蒸馏水混合定容并搅拌均匀。

3.2.2.6定容后，用pH计或pH试纸测pH值，用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl调节pH值至5.8～6.0。

3.2.2.7根据不同定量分装，每瓶30ml～40ml，盖好瓶盖或用封口膜封口，

3.3灭菌

将分装好的培养基、蒸馏水、接种器械、无菌纸、工作服、口罩、帽子等放入高压蒸汽灭菌锅内，采用湿热空气灭菌法（灭菌压力0.11MPa～0.14MPa、温度120℃~126℃、时间15min～20min）进行灭菌。培养基高压灭菌取出后，置于室温至培养基凝固后即可使用。

4外植体的选择与处理

4.1外植体的选择

选择观赏性状好、生长健壮、无病虫害、花期长的优良盆栽红掌品种，并选用带芽茎段为外植体。

4.2外植体处理

选择生长健壮的带芽茎段，在自来水下冲洗20min。在无菌室内把嫩茎放入75％的酒精中浸泡20s，用无菌水冲洗一遍，再用10％的次氯酸钠浸泡8min～10min，然后用无菌水冲洗6遍～7遍。

5接种与培养

5.1培养条件

光照强度2000Lx,光照时间每天12h，温度25℃±2℃。

5.2接种

5.2.1初代培养

在无菌纸上，将带芽茎段切成1cm～2cm小段，转接到初代培养基上诱导：MS+KT2.0mg/L+IBA5mg/L+蔗糖30mg/L+琼脂7mg/L。

5.2.2继代培养

初代培养55d～65d后，可将诱导形成的幼芽转接到MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L增殖培养基上，35d～45d转接1次，继代次数为10次～12次。

5.2.3生根培养

具有3片～4片叶，高2cm～3cm的无