《食品微生物检验技术》课件——项目一 试剂与培养基配制.pptVIP

03血清学反应常用试剂和培养基的制备7．PCA平板计数琼脂培养基（用于菌落总数测定的）称取胰蛋白胨5.0g，酵母浸粉2.5g，葡萄糖1.0g，琼脂15.0g，加入蒸馏水1000mL，煮沸溶解，调节pH7.0士0.2，然后分装试管或锥形瓶，121℃高压灭菌15min。即得。8．月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（金黄色葡萄球菌的检测）称取胰蛋白胨或胰酪胨20.0g，氯化钠5.0g，乳糖5.0g，磷酸氢二钾2.75g，磷酸二氢钾2.75g，月桂基磺酸钠0.1g，溶于1000mL蒸馏水中，调整PH6.8士0.2，然后分装到有玻璃小导管的试管中，每管10mL。121℃高压灭菌15min。03血清学反应常用试剂和培养基的制备9．脑心浸出液肉汤（用于金黄色葡萄球菌的检测）（1）配方胰蛋白质胨10.0g，氯化5.0g，磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O)2.5g，葡萄糖2.0g，牛心浸出液500mL。（2）制法加热溶解，调节pH7.4±0.2，分装16mmX160mm试管，每管5mL，置121℃高压灭菌15min。03血清学反应常用试剂和培养基的制备10．10％氯化钠胰酪胨大豆肉汤（LST）（用于金黄色葡萄球菌的检测）（1）配方胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化钠100g，磷酸氢二钾2.5g，丙酮酸钠10g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000mL。（2）制法将上述成分混合，加热，轻轻搅拌并溶解，调节pH7.3±0.2，分装，每瓶50mL,121℃高压灭菌。03血清学反应常用试剂和培养基的制备11．缓冲蛋白胨水（BPW）（用于沙门氏菌的前增菌）称取蛋白胨10g，氯化钠5g，磷酸氢二钠9g，磷酸二氢钾1.5g，蒸馏水1000mL。加热搅拌至溶解，调节pH7.2，121℃高压灭菌15min。12．250μg/mL牛血清白蛋白标准液准确称取250mg标准牛血清白蛋白，用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L，于3.4℃保存。03血清学反应常用试剂和培养基的制备13．血清肉汤（用于营养要求较高的细菌培养）（1）原料灭菌营养肉汤100mL，无菌血清（马、牛或羊）10mL。（2）制法取已制备好的营养肉汤，待冷却后，以无菌操作，加入灭菌血清，混匀后，分装于试管。感谢您的聆听THANKYOUFORLISTENING***********************04毒性酶类试验2．血浆凝固酶试验（1）原理致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中的纤维蛋白原转变成纤维蛋白，附着在细菌的表面，形成凝块；或作用于血浆凝固酶原，使它成为血浆凝固酶，从而使抗凝的血浆发生凝固现象，为阳性。04毒性酶类试验2．血浆凝固酶试验（2）试验方法以试管法为主。即找灭菌小试管3支，向三个试管中各加入1:1体积的血浆－无菌水0.5mL，1支加入被检菌株的营养肉汤培养液0.5mL；其余2支作对照管，其中一支加入金黄色葡萄球菌的营养肉汤培养液0.5mL作阳性对照；另一支加入0.9％氯化钠溶液0.5mL作空白对照。将3个试管同时放在37℃恒温箱或水浴中培养，每0.5h观察一次，4h内无凝固现象者，观察直至24小时。04毒性酶类试验2．血浆凝固酶试验（3）试管法的结果观察与记录空白对照管的血浆流动自如，阳性对照管血浆凝固。若试验管血浆凝固，则为阳性；如果三管均无凝固现象，即为阴性。本试验法所用到的试剂和培养基在血清学反应里介绍过，此处不再赘述。6.物质的量浓度溶液的配制目录/Contents1物质的量浓度溶液的配制物质的量浓度溶液的配制01物质的量浓度溶液的配制（1）计算与称量所称固体质量或量取液体的体积，用托盘天平或电子天平称量固体或用量筒量取液体。（2）溶解或稀释在烧杯中溶解，并用玻璃棒搅拌。（3）转移待溶液冷却到室温，将烧杯中的溶液沿玻璃棒注入容量瓶中。01物质的量浓度溶液的配制（4）洗涤用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁和玻璃棒2~3次，并把洗涤液全转移到容量瓶中。（5）定容向容量瓶中加入蒸馏水，在距离刻度2~3cm时，改用胶头滴管滴加蒸馏水至凹液面的最低点与刻度线相平。（6）摇匀并贴签盖好瓶塞，把容量瓶倒转和摇动多次，使得溶液混合均匀。贴好标签，并注明溶液的名称和浓度。01物质的量浓度溶液的配制物质的量浓度溶液的配制关键程序01物质的量浓度溶液的配制操作程序：以配制0.5mol·L－1的NaCl溶液250mL为例01物质的量浓度溶液的配制（4）洗涤用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁和玻璃棒2~3