原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
QQ1019057849
QQ1019057849
乳酸含量试剂盒裂解细胞必须使用超声波破碎？用震荡的方法破碎细胞可以吗？
其他物理法：高压均质（适合大规模样本）、反复冻融（适合动物细胞，但效率较低）。化学/酶解法：化学试剂或酶（如溶菌酶、纤维素酶）破坏细胞壁/膜。适用于特定细胞类型，与物理法结合使用以提高效率。
震荡破碎的可行性与注意事项
可行情况（其他物理法）：高压均质（适合大规模样本）、反复冻融（适合动物细胞，但效率较低。
化学/酶解法
化学试剂或酶（如溶菌酶、纤维素酶）破坏细胞壁/膜。适用于特定细胞类型，与物理法结合使用以提高效率。
二、震荡破碎的可行性与注意事项
可行情况(细胞类型)：
动物细胞：细胞膜较脆弱，震荡（如剧烈涡旋）可能有效，但需搭配化学裂解液（如RIPA裂解液）。
真菌细胞（如酵母）：需先用酶降解细胞壁，再结合珠磨震荡破碎。
植物细胞：需先研磨破坏细胞壁，再通过珠磨震荡进一步破碎。
样本量：适合小体积样本（如1-2mL），可使用含玻璃珠的EP管，通过涡旋振荡器剧烈震荡30秒至数分钟。
二、乳酸检测的特殊要求
乳酸含量试剂盒通常基于酶法（如乳酸脱氢酶LDH）或比色法，需注意：避免干扰物质：破碎过程中若使用化学试剂（如SDS），需确保其不与试剂盒试剂反应，建议优先选择物理法或温和的裂解液。
及时检测：破碎后尽快离心（如12000rpm，5分钟）取上清，避免乳酸在室温下被酶降解。预实验优化：对新细胞类型，建议同时尝试超声和震荡破碎，通过检测结果（如吸光度值）对比裂解效率。
三、推荐操作流程（以动物细胞为例）
1. 温和化学+震荡法：
细胞悬浮于RIPA裂解液（含蛋白酶抑制剂），加入玻璃珠（直径0.5mm），涡旋震荡30秒，冰yu30秒，重复3-5次。离心取上清，用于乳酸检测。
2. 真菌/植物细胞：
加入溶菌酶（真菌）或纤维素酶（植物）37℃孵育30分钟，再用珠磨法震荡破碎。
总结
震荡破碎可行，但需根据细胞类型优化条件：
动物细胞、真菌（预处理后）、植物细胞：可尝试震荡（珠磨）破碎，搭配合适裂解液。
细菌（尤其是革兰氏阴性菌）：优先选择超声波破碎，确保裂解充分。）细胞类型：
动物细胞：细胞膜较脆弱，震荡（如剧烈涡旋）可能有效，但需搭配化学裂解液（如RIPA裂解液）。
真菌细胞（如酵母）：需先用酶降解细胞壁，再结合珠磨震荡破碎。
植物细胞：需先研磨破坏细胞壁，再通过珠磨细胞震荡进一步破碎。
样本量：适合小体积样本（如1-2mL），可使用含玻璃珠的EP管，通过涡旋振荡器剧烈震荡30秒至数分钟。
文档评论（0）