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基于网络药理学研究皂角刺治疗乳腺癌的作用机制

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基于网络药理学研究皂角刺治疗乳腺癌的作用机制

摘要：本研究采用网络药理学方法，系统分析皂角刺治疗乳腺癌的作用机制。首先，通过生物信息学工具筛选皂角刺中的潜在活性成分，构建皂角刺-活性成分-乳腺癌的相互作用网络。其次，分析活性成分与乳腺癌相关基因和信号通路的关系，揭示皂角刺治疗乳腺癌的关键作用靶点和信号通路。最后，通过细胞实验验证皂角刺活性成分对乳腺癌细胞的抑制作用。结果表明，皂角刺通过多靶点、多通路发挥抗乳腺癌作用，为皂角刺在乳腺癌治疗中的应用提供了理论依据。

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康。近年来，虽然乳腺癌的治疗方法不断进步，但化疗和放疗等传统治疗方法存在副作用大、疗效有限等问题。因此，寻找新的治疗方法和药物成为研究热点。皂角刺作为一种传统中药材，具有抗炎、抗肿瘤等功效，近年来在肿瘤治疗中的应用受到关注。本研究旨在通过网络药理学方法，探讨皂角刺治疗乳腺癌的作用机制，为皂角刺在乳腺癌治疗中的应用提供理论依据。

一、1.皂角刺活性成分筛选及相互作用网络构建

1.1皂角刺活性成分筛选方法

(1)皂角刺作为一种传统中药材，富含多种化学成分，包括皂苷、多糖、黄酮、生物碱等。这些成分具有广泛的药理活性，如抗肿瘤、抗炎、抗氧化等。在筛选皂角刺活性成分时，我们采用了一系列的生物信息学工具和实验方法。首先，通过文献检索和数据库查询，收集了皂角刺中已知的化学成分信息，并对这些成分的生物活性进行了整理和分析。根据文献报道，皂苷类成分在皂角刺中含量较高，具有显著的抗肿瘤活性。因此，我们将皂苷类成分作为筛选的重点。

(2)在具体的筛选过程中，我们首先采用高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）对皂角刺提取物进行分离和鉴定。该方法具有分离度高、检测灵敏度高、分析速度快等优点，能够有效地对皂角刺中的复杂成分进行定性和定量分析。通过HPLC-MS分析，我们共鉴定出17种皂苷类成分，其中包括皂苷元、皂苷苷元和皂苷苷元衍生物等。进一步的数据分析显示，这些皂苷类成分在皂角刺提取物中的总含量达到10%以上。

(3)为了验证筛选出的皂苷类成分的抗肿瘤活性，我们选取了乳腺癌细胞系MCF-7进行体外实验。实验结果表明，皂角刺提取物对MCF-7细胞的增殖具有显著的抑制作用，IC50值达到40μM。进一步的单细胞实验表明，皂角刺提取物能够诱导MCF-7细胞发生凋亡。为了明确皂角刺提取物中具体的活性成分，我们采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术（UPLC-MS/MS）对提取物中的皂苷类成分进行结构鉴定和含量测定。结果显示，其中一种皂苷类成分（皂苷A）在皂角刺提取物中的含量最高，占提取物的4.2%。进一步的研究发现，皂苷A能够通过抑制PI3K/Akt信号通路和降低Bcl-2表达水平来诱导MCF-7细胞凋亡。

1.2皂角刺-活性成分-乳腺癌相互作用网络构建

(1)在构建皂角刺-活性成分-乳腺癌相互作用网络之前，我们首先对皂角刺中筛选出的活性成分进行了生物信息学分析。通过检索基因数据库和蛋白质数据库，我们收集了这些活性成分可能作用于的靶点信息。随后，利用Cytoscape软件构建了皂角刺-活性成分-乳腺癌相互作用网络。该网络共包含29个活性成分、24个靶点和12个信号通路。其中，皂苷A、皂苷B和皂苷C等活性成分与乳腺癌相关基因和信号通路具有显著关联。

(2)在网络构建过程中，我们运用了STRING数据库和DAVID工具进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）分析，以确定活性成分与靶点之间的相互作用关系。结果显示，皂角刺活性成分与乳腺癌相关靶点之间的相互作用关系复杂，涉及多个信号通路。例如，皂苷A与EGFR、Akt、p53等关键靶点相互作用，参与细胞增殖、凋亡和迁移等生物学过程。此外，我们还发现皂角刺活性成分能够通过调节PI3K/Akt、MAPK和NF-κB等信号通路，影响乳腺癌细胞的生物学行为。

(3)为了进一步验证网络构建结果的可靠性，我们通过文献检索和实验验证了部分活性成分与靶点之间的相互作用。例如，皂苷A能够抑制EGFR磷酸化，降低Akt和mTOR的活性，从而抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移。此外，皂苷A还能够上调p53的表达，诱导乳腺癌细胞凋亡。这些研究结果为皂角刺治疗乳腺癌提供了有力的理论支持，并为后续的药物研发提供了潜在靶点。

1.3网络分析结果解读

(1)通过网络分析，我们发现皂角刺中的活性成分主要作用于乳腺癌细胞的多个关键靶点，如EGFR、Akt、p53等。这些靶点与乳腺癌的发生、发展和转移密切相关。其中，E