紫外可见分光光度法基本原理.docx

紫外可见分光光度法根本原理

透射比和吸光度

当一束平行光通过均匀的溶液介质时，光的一局部被吸取，一局部被器皿反射。设入射光强度为I，吸取光强度为I，透射光强度为I，反射光强度为I，则

0 a t r

在进展吸取光谱分析中，被测溶液和参比溶液是分别放在同样材料及厚度的两个吸取池中，让强度同为I0的单色光分别通过两个吸取池，用参比池调整仪器的零吸取点，再测量被测量溶液的透射光强度，所以反射光的影响可以从参比溶液中消退，则上式可简写为

透射光强度(It)与入射光强度(I0)之比称为透射比(亦称透射率)，用T表示，则有:

溶液的T越大，说明它对光的吸取越弱；反之，T越小，说明它对光的吸取越强。为了更明确地说明溶液的吸光强弱与表达物理量的相应关系，常用吸光度(A)表示物质对光的吸取程度，其定义为:

则A值越大，说明物质对光吸取越强。T及A都是表示物质对光吸取程度的一种量度，透射比常以百分率表示，称为百分透射比，T％；吸光度A为一个无因次的量，两者可通过上式相互换算。

朗伯-比耳定律

朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸取的根本定律，俗称光吸取定律，是分光光度法定量分析的依据和根底。当入射光波长肯定时，溶液的吸光度A是吸光物质的浓度C及吸取介质厚度l(吸取光程)的函数。朗伯和比耳分别于1760年和1852年争论了这三者的定量关系。朗伯的结论是，当用适当波长的单色光照耀一固定浓度的均匀溶液时，A与l成正比，其数学式为:

A=k＇l(此即称为朗伯定律，k＇为比例系数)

而比耳的结论是，当用适当波长的单色光照耀一固定液层厚度的均匀溶液时，A与C成正比，其数学表达式为:

(此即称为比耳定律，k称为比例系数)

合并上述k的数值取决于吸光物质的特性外，其单位及数值还与C和l所承受的单位有关。

l通常承受cm为单位，并用b表示。所以k的单位取决C承受的单位。当C承受重量单位g/L时，吸取定律表达为:

(a称为吸光系数，单位为 )

当C承受摩尔浓度mol/L时，吸取定律表达为:

(ε称摩尔吸光系数，单位为 )

有时在化合物的组成不明的状况下，物质的摩尔质量不知道，因而物质的量浓度无法确定，

就不能用摩尔吸光系数，而是承受比吸光系数

1cm吸取池时的吸光度，这时吸光度为:

，其意义是指质量分数为1％的溶液，用

(c的质量百分浓度)

ε、a、 三者的换算关系为：

，

在吸取定律的几种表达式中，

(Mr为吸取物质的摩尔质量)

在分析上是最常用的，ε也是最常用的，有时吸取

光谱的纵坐标也用ε或lgε表示，并以最大摩尔吸光系数 表示物质的吸取强度。ε是在

特定波长及外界条件下，吸光质点的一个特征常数，数值上等于吸光物质的浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时溶液的吸光度。它是物质吸光力量的量度，可作为定性分析的参考和估量定量分析的灵敏度。

朗伯比耳定律

朗伯－比耳定律的推导如下：依据量子理论，光是由光子所组成，其它能量为。因此，吸取光的过程就是光子被吸光质点(如分子或离子)的俘获，使吸光质点能量增加而处于激发状态，光子被俘获的几率取决于吸光质点的吸光截面积。如图1所示，

图1辐射吸取示意图

x如有一束强度为Io的单色平行光束，垂直通过一横截面积为S的均匀溶液介质。在吸取介质中，光的强度为Ix(Ix在光束通过介质的过程中，因光能量不断被吸取而渐渐变小)，当光束通过一个很薄的介质层db后，光强减弱了dI，则厚度为db的吸取层对光的吸取率为

x

量子理论说明，光束强度可以看作是单位时间内流过光子的总数，于是可以看作是光束通过吸取介质是每个光子被吸光物质吸取的平均几率。另一方面，由于液层厚度db为无限小，所以在这个小体积单元中，所以吸光质点所占的吸取截面积之和dS与横截面

积S之比 也可看作为该截面上光子被吸取物质吸取的几率。因此就有：

假设吸取介质中含有m种不同的吸光质点，而且它们之间没有相互影响，设ai为第I种吸光质点对指定波长的吸取截面积，dni为第I种吸光质点在db小体积单元之中的数目，则

代入上式，则得到:

当光束通过液层厚度为b时，对上式两边积分，得到:

依据吸光度的定义，

截面积S是均匀介质的体积V与液层度b之比，即S=V/b，代入上式，得到

i式中NA为阿佛加德罗常数。 为第I种质点在均匀介质中的浓度C，当V的单位为L

i

i时，Ci为摩尔浓度。将0.4343NAai合并为常数，当Ci为摩尔浓度时，该常数ε，则得到

i

上式说明，当一束平行单色光通过一个均匀吸取介质时，总吸光度等于吸取介质中各吸光物质吸光度之和，即吸光度