细胞传代详细步骤.docVIP

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细胞传代

1、75%乙醇擦手，取移液枪、枪盒、PBS、培养基放入超净台。

2、打开超净台（照明、风机）。然后用75%乙醇擦一下台面，点燃酒精灯。

3、取出胰酶，把胰酶和PBS的瓶盖打开或者拧松。

4、取待传代的细胞

5、用尖吸管弃去旧的培养基，吸量管加入PBS4ml左右，然后将PBS瓶收起来。

6、用尖吸管洗一下细胞，然后将PBS弃掉；

7、用吸量管吸取1ml胰酶加入。弃掉吸量管。

8、将细胞放入37度孵箱。将胰酶和PBS瓶放入4度。

9、取细胞，镜下观察消化情况。消化程度合适之后，取1-2ml培养基加入细胞，吹打，至所有细胞从培养皿底部脱落下来。

10、吸量管吸取适量培养基加入新的培养皿中。将培养基收至4度保存。弃掉吸量管。

11、细胞悬液加入新的培养皿中。镜下观察，摇匀，放入37度孵育。收超净台。

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