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ICS65.020.30
DB22
B44
吉林省地方标准
DB22/T2611—2017
梅花鹿冷冻精液
Sikadeerfrozensemen
吉林省质量技术监督局
发布
DB22/T2611—2017
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。
本标准起草单位:中国农业科学院特产研究所。
本标准主要起草人:杨镒峰、魏海军、许保增、赵伟刚、赵蒙、陈秀敏、鞠妍、曹新燕、薛海龙、
刁云飞、李晓霞、王世勇。
I
DB22/T2611—2017
梅花鹿冷冻精液
1
范围
本标准规定了梅花鹿冷冻精液的规格、标识、解冻后精子活力、前进运动精子数、畸形率、菌落数、
包装、储存运输。
本标准适用于梅花鹿冷冻精液的生产、销售和使用过程中精液的检测。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的
修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用
于本文件。
GB/T2828.11计数抽样检验程序第11部分:小总体声称质量水平的评定程序
GB/T5458液氮生物容器
NY1181
输精细管
下列术语和定义适用于本文件。
前进运动精子数progressivemotility
4.1细管
1
DB22/T2611—2017
4.1.3容量
≥0.18ml。
4.2冻融精液
4.2.1精子活力
≥30%(即0.3)。
4.2.2前进运动精子数
≥1000万个/管。
4.2.3畸形率
≤18%。
4.2.4细菌菌落数
≤100cfu/ml。
5抽样
根据每头梅花鹿冷冻精液不同的生产批次进行抽样检测,抽样方法应符合GB/T2828.11规定。
6试验方法
冷冻精液应装在包装物内,保存在液氮罐中,定期检查罐中液氮的量,并及时添加液氮以保持包装
物完全浸在液氮中,液氮罐应符合GB/T5458的规定。
2
DB22/T2611—2017
AA
附
录A
(规范性附录)
梅花鹿冷冻精液质量检测方法
A.1解冻
A.1.1器材
细管镊子、恒温水浴锅。
A.1.2解冻方法
从液氮罐中取出细管冻精,放入到39℃的水浴锅中,完全融化即可。
A.2容量
A.2.1器材
细管剪、细管推针、1.0ml量筒。
A.2.2方法
解冻方法见A.1.2,用细管剪剪去封口端,用细管推针将精液全部注入到1.0ml量筒内,读数即为
每支细管冷冻精液容量。
.................................(A.1)
n
n
Q——细管冻融精液容量,单位为ml;
n——检测冷冻精液支数。
3
DB22/T2611—2017
A.3.1.1器材
显微镜、精子动力分析系统、载玻片、盖玻片、移液器、枪头、小试管、试管架。
A.3.1.2方法
解冻方法见A.1.2,用移液器取充分混匀后的解冻精液(或A.2.1检测后的样品)7μl~10μl置于
预热好的载玻片上,盖上盖玻片后,立即在显微镜下观察(10×或40×物镜)精子活力,也可使用精子
动力分析系统观察活力,分别观察三个视野进行全面评定。
A.3.1.3计算
三个视野活力观察值的平均值按公式(A.2)计算:
+n
M=n1+n2
..................................(A.2)
3
3
式中:
M——精子活力,%;
n
n
n
1
——第一视野精子活力,%;
——第二视野精子活力,%;
——第三视野精子活力,%。
2
3
A.3.2前进运动精子数
A.3.2.1器材
血细胞计数板、血色素管、显微镜或精子动力分析系统、计数器、小试管、试管架、血盖片、移液
器、枪头、1.0ml吸管、3%氯化钠溶液。
解冻方法见A.1.2,解冻后精液充分混匀后用血色素管或移液器吸取0.02ml(或A.2.1检测后的样
品),缓慢注入到盛有0.98ml的3%氯化钠溶液的试管内,充分混匀,配制成稀释50倍的精液。用吸管
吸取稀释后精液置于血盖片边缘,使精液自行流入计数室,均匀充满整个计数室,不允许有气泡,然后
在显微镜下或精子动力分析系统中观察计数。
a)每支细管冻融精液精子数=5个方格中精子数×5(计数室内25个中方格中精子数)×10(1mm
内精子数)×1000(每毫升精子数)×50(稀释倍数)×容量
3
b)每样品观察相邻两个计数室,取平均值;如两个计数室计数结果误差超过5%,则应重新检测。
c)每支细管冻
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