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项目四

红墨水法快速测定种子生活力（玉米）

掌握特定浓度红墨水的配制方法；01掌握随机取样技巧；02掌握种子生活力观察鉴定方法；070304掌握样品浸泡处理方法；掌握种子处理的方法；考纲要求05掌握种子染色处理技巧；06掌握种子生活力观察鉴定方法；07树立安全生产、绿色生产意识，增强扬精益求精、实事求是的精神。

1.种子生活力的涵义指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力，亦指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率。341652种子生活力测定方法种子生活力的涵义种子生活力测定的主要方法四唑染色法（TTC法）红墨水染色法甲烯蓝法溴麝香草酚蓝法碘化钾显色法荧光测定法、软X射线造影法公认最有效且可靠的测定方法，被列入国际种子检验规程和我国农作物种子检验规程简便、快速、准确、低成本，生产上被广泛运用

2.种子生活力测定的意义测定休眠种子的生活力新收未度过后熟期和低温贮藏后处于休眠状态的种子，不能用标准发芽试验测出种子的最高发芽率，必须进一步测定其生活力。发芽率低而生活力高的种子，播种前应采取适当措施以破除休眠。发芽率和生活力均低的种子，不能作为播种材料。快速预测种子发芽能力发芽试验所需的时间较长，在收获和播种间隔较短时发芽试验还会耽误农时。在生产实践中，可用速测法测定种子生活力来作为发芽力的参考，林木种子还可用生活力来代替发芽力。

3.种子生活力测定的原理红墨水染色法是用5%的红墨水染色来判断种子生活力。将软化切分后的种子，用5%红墨水染色一定时间后，取出冲洗至洗液无色，根据胚的染色情况来判断种子生活力。有生活力种子的胚，其活细胞原生质膜具有选择透性，能阻止红墨水中的酸性大红G染料渗入，组织内部不被染色；无生活力种子的胚具有全透性，内部能被染成红色。胚的主要部位未被染色为有生活力种子，胚的主要部位被染色的为无生活力种子。（1）红墨水染色法胚与胚乳均被染成相同的深红色，无生活力胚不着色、胚乳红色，有生活力胚着色浅、胚乳红色，有生活力

3.种子生活力测定的原理（2）四唑染色法（TTC法）TTC（2，3，5-三苯基氯化四氮唑）是一种白色或淡黄色粉末，有微毒，对光敏感。四唑染色法采用TTC溶液进行种子胚染色，常用浓度为0.1%～1.0%，pH值6.5～7.5，通常现配现用，配好的溶液应贮于棕色瓶且置于阴凉黑暗处。从经净度分析后并充分混合的净种子中，随机数取每个重复100粒、共2～4个重复，或小于100粒的若干副重复，作为试验样品，每次至少测定200粒种子。将软化切分后的种子，用0.1%TTC溶液染色一定时间（一般30min），根据胚组织的染色情况区别有生活力和无生活力的种子。

3.种子生活力测定的原理（2）四唑染色法（TTC法）有生活力种子的胚细胞在进行呼吸作用，含有脱氢酶。进入种子的TTC能作为氢受体接受脱氢酶放出的氢离子（H+），而被还原成红色、稳定、不扩散和不溶于水的三苯基甲臜。凡胚的主要构造全部染成有光泽的鲜红色（或染色最大面积大于以下规定：盾片上下任一端三分之一不染色；胚根大部分不染色，但不定根原始体必须染色。盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤，为无生活力种子），且组织状态正常的为正常有生活力的种子。

4.红墨水法快速测定玉米种子生活力工具、材料和试剂准备种子染色生活力观察种子选取和切分种子冲洗结果表示与报告操作流程01020304070605场地整理

4.红墨水法快速测定玉米种子生活力工具准备（1）工具、材料和试剂准备瓷盘（1张）或塑料垫板（1个）、单面刀片（2张）、培养皿（3个）、500ml洗瓶（1个）、5ml移液管（1支）或5ml量筒（1个）、100ml量筒（1个）、250ml烧杯（1个）、200ml细口试剂瓶（1个）、玻璃棒（1根），镊子（1把）、手持放大镜（1个）、废液缸（1个）、废料缸（1个）、原始记载表（1张）、草稿纸（1张）。

4.红墨水法快速测定玉米种子生活力材料准备（1）工具、材料和试剂准备取玉米净种子300粒左右，用30℃温水浸泡3～4h（或40℃温水浸泡40～60min），或用冷水浸泡（湿纸浸润）12h。将软化后的种子装入小烧杯等敞口容器，贴好标签。

4.红墨水法快速测定玉米种子生活力染液（5%红墨水）准备（1）工具、材料和试剂准备按1︰19的比例，分别量取相应体积的市售红墨水和蒸馏水，倒入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀，即得5%红墨水。将配好的红墨水转移到细口试剂瓶中，贴好标签。

4.红墨水法快速测定玉米种子生活力（2）种子选取和切分将软化后的玉米种子充分混匀，用镊子随机数取100粒，放在瓷盘或塑料垫板上，不得挑选种子。凹面朝上，用单面刀片沿胚的中心纵切，选取胚的各部分比较完整的一半放入培养皿中，另一半放入指定容器