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ICS65.020.30
DB22
B44
吉林省地方标准
DB22/T2599—2016
梅花鹿精液采集及冷冻技术规程
Technicalspecificationofsemencollectingandfrozeninginsikadeer
吉林省质量技术监督局
发布
DB22/T2599—2016
前言
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。
本标准起草单位:中国农业科学院特产研究所。
本标准主要起草人:赵伟刚、魏海军、许保增、杨镒峰、赵蒙、陈秀敏、曹新燕、鞠妍、薛海龙。
I
DB22/T2599—2016
梅花鹿精液采集及冷冻技术规程
1范围
本标准规定了梅花鹿精液采集前准备、稀释液配制、电刺激采精、精液处理及冷冻保存。
本标准适用于梅花鹿精液采集及冷冻生产。
2
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T5458液氮生物容器
GB6935中国梅花鹿种鹿
GB18596
畜禽养殖业污染物排放标准
NY1181输精细管
3
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
采精场应设在距公鹿圈较近处,拨鹿安全方便,应宽敞、安静,地面清洁卫生。
采精员准备
4.3仪器设备
预先使冷藏柜平衡在4℃,恒温箱和水浴锅处于37℃工作状态,电刺激采精仪使用前应进行检查,
5稀释液
1
DB22/T2599—2016
表5.1鹿冷冻精液稀释液推荐配方
成分
Tirs
含量
2.7g
1.53g
柠檬酸
葡萄糖
甘油
1.0g
6.0ml
双蒸水
定容至100.0mL
5.2
稀释液配制方法
先用电子天平称取Tirs、柠檬酸和葡萄糖,放入三角烧瓶中,再把三角烧瓶放在电子天平上,归
零后直接用三角烧瓶称取甘油,用量桶量取双蒸水,倒入三角烧瓶中,并摇晃使药品充分溶解,放入蒸
锅内蒸汽灭菌30min,冷却后取出待用。使用前加入20%卵黄和青霉素、链霉素各10万单位,用磁力搅
拌器充分搅拌均匀后放入3℃~5℃的冰箱中待用,放置时间不得超过24h。
6采精
6.1种公鹿的要求
种公鹿应符合GB6935的规定。
6.2采精方法
表1
项目
内容
2
DB22/T2599—2016
冷冻精液剂型为0.25ml细管,细管应符合NY1181的要求。精液稀释10min后,用细管灌封仪进行
分装、标记和封口。每支细管含有效精子数1000万~1500万。
7.2.3平衡
分装后的细管精液,用2层~3层干毛巾包裹后放入4℃冷藏柜中平衡3h~4h。
8
精液冷冻
冷冻方法
8.1
8.1.1程序冷冻仪冷冻
按照程序冷冻仪的说明进行操作。如果冻精细管数量不足时,要填充备用塑料细管和细管架以保持
最佳冷冻曲线程序自动完成冷冻过程,确保冻精质量。
8.1.2广口冷冻罐冷冻
将平衡好的细管精液均匀铺于冷冻架上,使冷冻架与液氮面保持2cm~2.5cm的高度,冷冻温度控
制在-120℃~-140℃,冷冻时温度回升的最高值不得高于-90℃,5min~8min后将冷冻架浸入液
氮中。
8.2冻精检查与保存
8.2.1冻精检查
冻精贮存于的液氮罐中,定期添加液氮,应保证冻精始终浸在液氮中,液氮罐应符合GB/T5458
3
DB22/T2599—2016
AA
附
录A
(规范性附录)
梅花鹿电刺激采精程序
A.1
公鹿保定
将采精公鹿拨入保定器内保定,可辅以少量麻醉药物,使鹿呈站立状态。如无保定器,也可直接用
麻醉药物麻醉,呈全麻状态,使鹿体呈侧卧姿势。
A.2公鹿处置
排除宿粪,用剪毛剪剪短尿道口附近的长毛,用刺激性较小的消毒剂或蒸馏水清洁尿道口部位,导
出阴茎并用纱布将龟头下端阴茎缠绕住(不要过紧),使龟头露出,然后用灭菌纱布擦干阴茎及龟头。
A.3采精
将电极棒徐徐插入直肠15cm~20cm并使电极部位与直肠腹面接触,检查电压是否在零位。打开电压
开关,调节电压调节按钮使电压由低向高,并在每档通、断交替刺激5~10次,每次通电5~8秒,间断5~
8秒,当电压升至射精档位时,在该档继续交替刺激直至射精完毕,也可再升一档电压刺激,使其充分
射精。用集精杯分段接取精液,注意更换集精杯,避免混进副性腺液或尿液。采精后的公鹿注射解药使
其苏醒。
4
DB22/T2599—2016
BB
附录B
(规范性附录)
鹿冷冻精液细管标记方法
B.1细管冷
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