DB51T 1546-2012 植物检疫实验室常规检验技术 真菌　.docxVIP

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DB51

四川省地方标准DB51/T1546—2012

植物检疫实验室常规检验技术真菌

2012-12-20发布2013-03-01实施

四川省质量技术监督局发布

I

DB51/XXXXX—2012

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4原理 2

5试剂与材料 2

6仪器与用具 2

7取样及送样要求 2

8检测方法 3

9结果判定 3

附录A(资料性附录)真菌病害主要症状特征 4

附录B(资料性附录)真菌病害显微镜检查 6

附录C(资料性附录)真菌病害染色检验 7

附录D(资料性附录)真菌病害分离培养检验 8

IⅡ

DB51/XXXXX—2012

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则进行编写。本标准由四川省农业厅提出并归口。

本标准由四川省质量技术监督局发布。

本标准起草单位：四川省农业厅植物检疫站。

本标准主要起草人：宁红、李小松、刘可、赵兰鸰、帅波、黄玲、熊玉兰、杨重渝、袁曦。

DB51/XXXXX-2012

1

植物检疫实验室常规检验技术真菌

1范围

本标准规定了植物检疫实验室真菌的检验程序和检验技术。本标准适用于植物检疫实验室真菌的检验和鉴定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB15569-2009农业植物调运检疫规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1病原真菌plantpathogenicfungi

能够寄生于植物并引起植物出现病理过程的一类真菌。

3.2症状symptom

植株受病原菌侵染后，内部生理活动和外观上的生长发育呈现出某种异常状态。3.3病征sign

病原菌在植物受害部位产生的结构特征。

3.4菌丝和菌丝体hyphaandmycelium

真菌的典型营养体，通常呈丝状，单根的叫菌丝，菌丝的集合体叫菌丝体。

3.5子实体fruitbody

真菌产生孢子的结构，如子囊果、担子果、分生孢子器、分生孢子盘、子座等，统称为子实体。

3.6菌落colony

真菌在人工培养基表面自由繁殖和扩展后，形成具有特定的形状、大小和颜色的营养体或繁殖体的群体组织。

3.7无性孢子asexualspore

真菌不经过性细胞或性器官的结合而从营养体上直接形成繁殖体，主要有游动孢子、孢囊孢子和分生孢子等。

2

DB51/XXXXX—2012

3.8有性孢子sexualspore

真菌通过两个可交配的性细胞或性器官的结合而产生的繁殖体，主要有卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担子孢子等。

3.9柯赫氏法则KochsRule

如发现一种不熟悉的或新的病害时，应按柯赫氏法则的四个步骤来完成诊断与鉴定。

4原理

对具有典型症状的真菌病害，可根据特有的症状和镜检观察菌丝及孢子形态进行鉴定；对症状不明显的真菌病害，可采用保湿培养或分离培养的方法，促使病原菌产生孢子，再根据病原菌形态特征进行鉴定；对通过分离培养仍不能确定病原菌的病害，需按照柯赫氏法则进行鉴定。

5试剂与材料

试剂与材料如下，包括：

——乳酚油(苯酚结晶20mL,乳酸20mL,甘油40mL,蒸馏水20mL)——酒精(70%、95%)

——龙胆紫(0.04%)

———甘油乳酸(乳酸10mL,甘油20mL,蒸馏水10mL)——酒精冰醋酸混合液(95%酒精20mL,冰醋酸20mL)

——苯胺蓝水溶液(苯胺蓝0.1g,蒸馏水100mL)—水合氯醛水溶液(水合氯醛5g,蒸馏水2mL)

——升汞水溶液(升汞1g,浓盐酸2.5mL,蒸馏水1000mL)

——福尔马林醋酸酒精固定液(FAA)(95%酒精20mL,福尔马林5mL,冰醋酸5mL,蒸馏水35mL)

———培养基(见附录D)

6仪器与用具

仪器与用具如下，包括：

显微镜、扩大镜、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、培养皿、三角瓶、载玻片(盖玻片)、刀片、酒精灯、移植针、镊子、解剖刀、透明胶带等。

7取样及送样要求

7.1取样要求

调运检疫样品按照GB15569-2009附