DB22_T2908-2018_长白山林蛙油的测定高效液相色谱法_吉林省.docxVIP

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DB22

X04

吉林省地方标准

DB22/T2908—2018

长白山林蛙油的测定高效液相色谱法

DeterminationofchangbaimountainranaeoviductusHPLCmethod

吉林省市场监督管理厅

发布

DB22/T2908—2018

前

言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。

本标准由吉林省林业厅提出并归口。

本标准起草单位：吉林大学。

本标准起草人:王永生、徐阳、王诗涵、鲍慧玮、赵中原、崔庆艳、肖瑶、刘敏、王艳伟、房永清、

王道君、王仁祥、伊常青。

I

DB22/T2908—2018

长白山林蛙油的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了用高效液相色谱法对长白山林蛙油（ChangbaimountainRanaeOviductus）进行定

性测定。

本标准适用于长白山林蛙油的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T19507地理标志产品吉林长白山中国林蛙油

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

长白山林蛙油changbaimountainranaeoviductus

长白山林蛙油是主产于长白山的林蛙油，即《中华人民共和国药典》2015版一部收载的哈蟆油，为

蛙科动物中国林蛙RanatemporariachensinensisDavid雌蛙的输卵管，经采制干燥而得。

4

原理

胆固醇对照品（供鉴别用）（C27H46O)。

色谱乙腈（C2H3N）。

1

DB22/T2908—2018

6.340目筛。

6.4圆底烧瓶（100mL）。

6.5量筒（50mL）。

6.6水浴锅。

6.7普通漏斗（100mL）。

6.8滤纸。

6.9圆底烧瓶（250mL）。

6.10旋转蒸发仪。

6.11循环水式真空泵。

6.12容量瓶（2mL）。

6.13微孔滤膜（0.45μm）。

6.14容量瓶（100mL）。

6.15高效液相色谱仪。

6.16十八烷基键合硅胶色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）。

7样品

符合GB/T19507要求的长白山林蛙油。

8试验步骤

8.1试样制备

8.2.1精密称定上述粉末约3g（6.1），置于100mL圆底烧瓶（6.4）中，加入无水乙醇（5.1）40mL

（6.5），80℃水浴回流提取15min（6.6），放冷，过滤（6.7，6.8），滤渣再同法提取2次，合并

滤液（6.9），减压回收乙醇（6.10，6.11），得提取物。

8.2.2取上述提取物（8.2.1），加入适量二氯甲烷（5.2）溶解，并转移至2mL的容量瓶（6.12）中，

挥干，加甲醇（5.3）定容至刻度，摇匀。用0.45μm微孔滤膜（6.13）滤过，取续滤液，即得供试品

溶液。

精密称取胆固醇对照品（5.4）约10mg（6.1），置于10mL容量瓶中（6.14），加甲醇溶解并定容

至刻度，配制成浓度为1mg/mL的对照品溶液。

高效液相色谱仪（6.15），十八烷基键合硅胶色谱柱（6.16）；流动相：乙腈（A）-水（B）梯度

洗脱（5.5，5.6），洗脱条件见表1；检测波长：215nm；柱温：30℃；进样量：5μL。

2

DB22/T2908—2018

时间

min

流动相A

%

流动相B

%

流速

mL/min

0～20

20～27

27～29

29～40

40～55

55～63

63～80

0

0→12

76

100

100→88

24

1

2

2

76

24

0.5

1

76→85

85→100

100

24→15

15→0

0

2

2

8.5试样测定

分别精密吸取对照品溶液5μL（8.3）、供试品溶液5μL（8.2），注入高效液相色谱仪（6.15），

按“8.4”项下色谱条件进行测定，记录色谱图。

9试验数据处理

供试品图谱中应有10个特征峰，与对照品参照物峰相应的峰为S峰（见附录A图A,1），计算各特征

峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10%之内。规定值为：0.10（峰1）、0.24（峰

2）、0.28（峰3）、0.38（峰4）、0.67（峰5）、0.68（峰6）、0.71（峰7）、0.73（峰8）、0.74（峰

9）、1.00（峰S）（见附录A图A.2）。

积分参数斜率灵敏度为1