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毕业设计（论文）

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miRNA的作用机制及功能研究进展

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miRNA的作用机制及功能研究进展

摘要：microRNA（miRNA）是一类长度约为22个核苷酸的非编码RNA分子，通过结合靶基因mRNA的3-非翻译区（3-UTR）来调控基因表达。本文综述了miRNA的作用机制及功能研究进展，包括miRNA的生物合成途径、调控靶基因的机制、在多种疾病中的表达异常及其临床应用。通过对现有研究的总结，旨在为miRNA的研究和应用提供参考。

随着分子生物学技术的发展，非编码RNA在基因调控中的作用逐渐受到重视。miRNA作为一种重要的非编码RNA，在生物体内发挥着关键的调控作用。近年来，miRNA的研究取得了显著的进展，其在基因表达调控、细胞分化和发育、疾病发生发展等方面具有重要作用。本文将从miRNA的作用机制、功能研究进展等方面进行综述，以期为miRNA的研究和应用提供参考。

一、miRNA的生物合成与加工

1.1miRNA的生物合成途径

(1)miRNA的生物合成途径是一个复杂的过程，它始于细胞核内，经过一系列的加工和修饰，最终形成成熟的miRNA分子。首先，miRNA的前体转录本（pri-miRNA）在RNA聚合酶II的催化下合成。这个前体转录本通常包含多个miRNA基因，它们通过碱基互补配对形成二级结构。随后，pri-miRNA被核内RNA酶Drosha切割，产生含有茎环结构的pre-miRNA。pre-miRNA随后被转运到细胞质中，在那里它被另一个RNA酶Dicer进一步切割，形成具有典型茎环结构的miRNA前体（pre-miRNA）。这个前体miRNA包含一个成熟的miRNA分子和一个互补的miRNA分子，以及一个连接这两个分子的茎环结构。

(2)接下来，pre-miRNA在RISC（RNA诱导的沉默复合物）中发挥作用。RISC由Ago蛋白家族成员、miRNA和某些辅助蛋白组成。在这个复合物中，miRNA与Ago蛋白结合，并指导Ago蛋白识别并结合到靶mRNA的3-非翻译区（3-UTR）。这一结合过程导致靶mRNA的降解或翻译抑制。在这个过程中，miRNA的茎环结构有助于其与Ago蛋白的结合，而miRNA的成熟部分则负责识别和结合靶mRNA。此外，miRNA的5-磷酸基团和3-羟基基团在RISC的组装和活性中起着关键作用。

(3)miRNA的生物合成途径受到多种因素的调控，包括转录后修饰、RNA酶活性、蛋白质复合物组装等。例如，miRNA的成熟过程受到Drosha和Dicer酶活性的调控，这些酶的活性可以通过磷酸化、乙酰化等修饰方式被调节。此外，miRNA的稳定性也受到多种因素的影响，如RNA结合蛋白、RNA降解酶等。这些调控机制确保了miRNA在细胞内的精确表达和功能发挥。研究表明，miRNA的生物合成途径的异常可能导致多种疾病的发生，如癌症、神经退行性疾病和心血管疾病等。因此，深入理解miRNA的生物合成途径对于揭示疾病的发生机制和开发新的治疗策略具有重要意义。

1.2miRNA的加工过程

(1)miRNA的加工过程是一个精细调控的步骤，它确保了成熟的miRNA分子能够正确地结合到靶mRNA上，从而实现有效的基因调控。在miRNA的加工过程中，首先由Drosha酶在细胞核内对pri-miRNA进行切割，产生约70-100个核苷酸长的pre-miRNA。这一过程大约发生在细胞周期的G1和S期。随后，pre-miRNA被转运到细胞质中，在那里Dicer酶对其进行进一步的切割。Dicer酶切割pre-miRNA的5端和3端，产生约22个核苷酸长的miRNA分子和约21个核苷酸长的miRNA反义分子，形成一个双链RNA结构。

(2)双链RNA随后被解旋，释放出成熟的miRNA分子和其互补的miRNA反义分子。这一过程由RdRP（RNA解旋酶）和RDE-4（RNA解旋酶4）等酶催化。解旋后的miRNA分子与Ago蛋白结合，形成RISC复合物。在RISC中，miRNA的成熟部分与Ago蛋白的PAZ结构域结合，而其反义部分则与Ago蛋白的PIWI结构域结合。这一结合过程对于miRNA识别并结合到靶mRNA至关重要。研究表明，miRNA的加工过程受到多种调控因子的调节，例如，miR-17-92簇的成熟受到Myc蛋白的调控。

(3)在miRNA的加工过程中，一些关键蛋白的突变或缺失会导致miRNA表达异常，进而引发疾病。例如，Dicer酶的突变与多种癌症的发生有关，如肺癌、乳腺癌和卵巢癌等。在乳腺癌细胞中，Dicer酶的突变会导致miR-200家族成员的缺失，进而导致E-钙