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真菌基因组学中的LaeA调控机制研究
目录
内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1.1真菌在生态系统中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.1.2LaeA基因的发现与功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.2研究目的和内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
1.2.1研究目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
1.2.2研究范围与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
LaeA基因结构与表达调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
2.1LaeA基因的结构分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
2.1.1LaeA蛋白的一级结构．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.1.2LaeA蛋白的功能域识别．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
2.2LaeA基因表达模式．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.2.1在不同环境条件下的表达变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
2.2.2转录因子对LaeA基因表达的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
LaeA蛋白的功能分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
3.1LaeA蛋白的生物学功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
3.1.1信号传导途径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
3.1.2细胞壁合成与修饰．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
3.2与其他相关蛋白的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
3.2.1与细胞壁相关的其他蛋白．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
3.2.2与其他真菌生长因子的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
LaeA调控机制的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
4.1分子机制研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
4.1.1转录激活子的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
4.1.2DNA结合位点分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
4.2信号通路研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
4.2.1细胞内信号转导路径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
4.2.2信号通路的调节机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
LaeA调控机制的实验研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
5.1实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
5.1.1菌株与培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
5.1.2蛋白质提取与纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
5.1.3生物信息学分析工具．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
5.1.4荧光定量PCR等检测技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51
5.2LaeA表达调控的实验结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
5.2.1不同条件对LaeA表达的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54
5.2.2关键调控因子的作用验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55
5.2.3突变体分析与表型验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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