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分子生物学实验中的蛋白质结构与功能研究

目录

一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1蛋白质在生命活动中的核心地位．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2蛋白质结构与功能研究的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3蛋白质结构-功能关系的普遍规律．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

二、蛋白质结构层次．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1蛋白质的一级结构．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1.1氨基酸的结构与性质．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.1.2蛋白质测序技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.2蛋白质的二级结构．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2.1α螺旋与β折叠．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.2.2其他二级结构形式．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.3蛋白质的三级结构．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.3.1蛋白质折叠的驱动因素．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.3.2结构域与超结构域．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.4蛋白质的四级结构．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

2.4.1亚基相互作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.4.2协同效应与寡聚体类型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

三、蛋白质结构研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

3.1化学方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

3.1.1X射线单晶衍射技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

3.1.2核磁共振波谱法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.1.3场解析技术（圆二色谱、光散射等）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

3.2计算机模拟方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

3.2.1分子动力学模拟．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.2.2蛋白质结构预测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

3.3功能分析法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

3.3.1酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.3.2结合位点分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.3.3功能突变体构建与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

四、蛋白质功能研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

4.1生物化学方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

4.1.1酶动力学研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

4.1.2蛋白质相互作用分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

4.2细胞生物学方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

4.2.1蛋白质定位与表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

4.2.2细胞功能干预实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

4.3基因组学方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

4.3.1功能基因组学研究策略．．．．．．．．．．．．