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食品中番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚的测定

BJS201917

1范围

本方法规定了食品（含保健食品）中番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚含量的高效液相色

谱-串联质谱测定方法。

本方法适用于饮料、代用茶等食品及片剂、胶囊、颗粒剂、口服液等剂型的保健食品中番

泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚含量的测定。

2原理

试样经甲醇-甲酸铵溶液（9:1）超声提取、离心、过滤后，滤液供高效液相色谱-质谱联用

仪测定，外标法定量。

3试剂和材料

注：水为GB/T6682规定的一级水。

3.1试剂

3.1.1甲酸（HCOOH）：色谱纯。

3.1.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。

3.1.3甲酸铵（CHNO）：色谱纯。

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3.2试剂配制

3.2.1甲酸溶液（0.1%）：取甲酸（3.1.1）1.0mL用水稀释至1000mL。

3.2.2甲酸铵溶液(2mmoL/L)：称取甲酸铵（3.1.3）0.13g（精确至0.01g），溶于水并稀释至1L。

3.2.3甲醇-甲酸铵溶液（9:1）：取甲醇（3.1.2）900mL，加入100mL甲酸铵溶液（3.2.2），混匀。

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3.3标准物质

番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分

子量见附录A表A.1。番泻苷B和番泻苷A的纯度均≥95.0%，大黄素甲醚纯度≥99.0%。

3.4标准溶液配制

3.4.1番泻苷A标准储备液（40μg/mL）：准确称取番泻苷A（3.3）10.0mg(精确至0.0001g)，置

250mL量瓶中，加入甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）200mL，超声（40℃）使溶解，冷却至室

温，用甲醇-甲酸铵溶液定容至刻度，摇匀，制成浓度为40μg/mL标准储备液，-20℃保存，保

存期3个月。

3.4.2番泻苷B标准储备液（40μg/mL）：准确称取番泻苷B（3.3）10.0mg(精确至0.0001g)，置

250mL量瓶中，加入甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）200mL，使其溶解，用甲醇-甲酸铵溶液

定容至刻度，摇匀，制成浓度为40μg/mL标准储备液，-20℃保存，保存期3个月。

3.4.3大黄素甲醚标准储备液（40μg/mL）：准确称取大黄素甲醚（3.3）10.0mg(精确至0.0001g)，

置250mL量瓶中，加入甲醇（3.1.2）200mL，超声（40℃）使溶解，冷却至室温，用甲醇定容

至刻度，摇匀，制成浓度为40μg/mL标准储备液，-20℃保存，保存期3个月。

3.4.4混合标准中间液（10μg/mL）：分别准确吸取番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚标准储备

液(40μg/mL)各2.5mL，用甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）稀释至10mL，摇匀，制成10μg/mL

的混合标准中间液，-20℃保存，保存期1个月。

3.4.5混合标准系列工作液的制备：分别准确吸取混合标准中间液（10μg/mL）（3.4.4）适量，用

甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）稀释，摇匀，作为系列混合标准工作溶液，浓度依次为各化合

物0.25μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、4.0μg/mL、8.0μg/mL，临用新制或依仪器响

应情况配制适当浓度的混合标准工作溶液。或根据需要采用空白基质提取液（5.1.3），配制适

当浓度的基质混合标准工作溶液。

4仪器和设备

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4.1高效液相色谱-质谱联用仪，配有电喷雾（ESI）离子源。

4.2天平：感量分别为0.00001g和0.0001g。

4.3超声波清洗器。

4.4涡旋混匀器。

4.5离心机：转速≥3000r/min。

5分析步骤

5.1试样制备

5.1.1固态试样