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初代培养:芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程。第61页,共89页,星期日,2025年,2月5日继代培养:更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料(愈伤组织、芽)。第62页,共89页,星期日,2025年,2月5日生根培养:将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程。第63页,共89页,星期日,2025年,2月5日初代培养继代培养生根培养驯化移栽植物组织培养一般过程第64页,共89页,星期日,2025年,2月5日思考:
各种组织培养类型有何主要的异同处?
★相同点:无菌操作人工培养基上培养★不同点:外植体不同成苗途径与培养方法不同
第65页,共89页,星期日,2025年,2月5日三、植物组织培养的特点第66页,共89页,星期日,2025年,2月5日1、培养材料经济第67页,共89页,星期日,2025年,2月5日2、培养条件人为控制,周年生产第68页,共89页,星期日,2025年,2月5日3、生长周期短,繁殖率高第69页,共89页,星期日,2025年,2月5日4、管理方便,有利于实现工厂化生产和自动化控制第70页,共89页,星期日,2025年,2月5日(二)植物组织培养的基本理论1.细胞全能性理论2.植物的再生性3.根芽激素理论4.组培苗的遗传稳定性第71页,共89页,星期日,2025年,2月5日1细胞全能性理论植物每一个具有完整细胞核的体细胞,都含有植物体的全部遗传信息,在适当条件下,具有发育成完整植株的潜在能力。第72页,共89页,星期日,2025年,2月5日②创造理想的适于细胞生长和分化的环境植物细胞全能性表达的条件①体细胞与完整植株分离,脱离完整植株的控制第73页,共89页,星期日,2025年,2月5日细胞全能性的实现与利用第74页,共89页,星期日,2025年,2月5日①直接分生芽②形成愈伤组织,再分化形成芽③形成胚状体,由胚状体直接重建完整植株,或制成人工种子后再重建植株。实现细胞全能性的途径:34第75页,共89页,星期日,2025年,2月5日第76页,共89页,星期日,2025年,2月5日2植物的再生性
现象:伤口愈合扦插生根
植株再生的过程即为植物细胞全能性表达的过程,经过脱分化和再分化两个阶段。第77页,共89页,星期日,2025年,2月5日组织分裂分化细胞分裂已分化组织细胞脱分化分裂再分化器官植株录像第78页,共89页,星期日,2025年,2月5日液氮罐(用于冻存培养的动物细胞)第29页,共89页,星期日,2025年,2月5日二细胞培养的基本技术
——无菌操作细胞工程的所有试验都要求在无菌条件下进行,要求十分严格的无菌操作。1、准备室、接种室、培养室(紫外线、熏蒸等);2、超净工作台、高压灭菌设备、过滤器;3、生物材料的消毒(酒精、升汞、次氯酸钠等);4、试验器械、器皿的灭菌(干热、湿热);5、药品、培养基的灭菌(湿热、过滤);第30页,共89页,星期日,2025年,2月5日——细胞培养技术细胞培养是指动物、植物或微生物细胞在体外无菌条件下的保存和生长。(微生物培养、植物细胞培养、动物细胞培养)基本步骤包括:获取原材料及除菌;配制培养基,对培养基进行灭菌;接种、培养和传代。第31页,共89页,星期日,2025年,2月5日——细胞融合技术离体条件下将不同生物或同种生物不同类型的单细胞通过无性方式融合成一个杂合细胞的技术。——单克隆抗体细胞融合技术的主要过程:制备原生质体(植物);诱导细胞融合(化学融合剂介导、电融合、病毒融合剂介导等);筛选杂合细胞。第32页,共89页,星期日,2025年,2月5日第33页,共89页,星期日,2025年,2月5日植物细胞工程植物组织培养细胞培养体细胞胚发生单倍体培养合子胚培养原生质体培养与细胞融合快速繁殖技术植物脱毒技术次生物质与植物细胞的大量培养人工种子第34页,共89页,星期日,2025年,2月5日思考:植物有哪些繁殖方法?第35页,共89页,星期日,2025年,2月5日分株繁殖压条繁殖播种繁殖嫁接繁殖第36页,共89页,星期日,2025年,2月5日扦插繁殖组织培养繁殖第37页,共89页,星期日,2025年,2月5日第一节植物组织培养(tissueculture)技术第38页,共89页,星期日,2025年,2月5日一、植
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