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温度在20-27℃左右,空调控温,湿度恒定,相对湿度在70-80%,光照由定时开关控制,每天光照10-16h左右,不同植物决定光照时间,培养室可采用太阳光为能源,易成活,阴雨天用室内灯光补光。第55页,共91页,星期日,2025年,2月5日二、营养成分植物体内至少含有几十种化学元素,其中大部分元素在植物体内起到一定的生理作用:a、组成各种化合物,参与机体的建造,成为结构物质;b、构成一些特殊的生理活性物质,参与活跃的新陈代谢;c、元素之间相互协调,以维持离子浓度平衡、胶体稳定、电荷平衡点等化学方面的作用;d、发育方面,特定的元素影响植物的形态发生和组织、器官建成。第56页,共91页,星期日,2025年,2月5日Arnon和Stout(1939)提出的确定植物必需营养元素的3个标准:A、缺乏该元素,植物生育发生障碍,不能完成其生活史;B、缺乏该元素,就表现为专一的病症,且这种缺素症可以用补充该元素来预防和恢复;C、该元素在植物营养生理上表现直接的效果,而不是由于土壤的物理、化学、微生物条件的变化而产生的间接效果。第57页,共91页,星期日,2025年,2月5日国内外公认的高等植物所必需的营养元素有16(17)种:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl、(Ni)在植物中含量差别很大,同一元素在植物不同时期、不同条件下含量也不同。第58页,共91页,星期日,2025年,2月5日根据植物体内含量多少,可把这些元素分为※大量营养元素:占干物质重量的0.1%以上;C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S等9种※微量营养元素:占干物质重量的0.1%以下,有的只含0.1mg/kg,Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等7种按照国际植物生理协会的建议:所需浓度0.5mmol/L的元素为大量元素所需浓度0.5mmol/L的元素为微量元素第59页,共91页,星期日,2025年,2月5日1、大量元素N是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分,在植物生命活动中占有重要的位置。P是磷脂的主要成分。培养基中常用KH2PO4、NaH2PO4等。K对碳水化合物合成,转移,以及氮素代谢等有密切关系。第60页,共91页,星期日,2025年,2月5日Mg、S、Ca是叶绿素的组成成分,又是激酶的活化剂,对核蛋白体结构具有稳定作用;S是含S氨基酸的蛋白质的组成成分。Ca是构成细胞壁的成分,对细胞分裂,稳定质膜结构有显著作用,此外,Ca及钙调素在细胞信号转导中起重要作用。第61页,共91页,星期日,2025年,2月5日2、微量元素在微量元素中,铁的使用最大:◆一些氧化酶的组成成分◆叶绿素形成的必要条件◆使用乙二胺四乙酸铁(EDTA-Fe)鳌合物防止铁的沉淀第62页,共91页,星期日,2025年,2月5日硼与蛋白质合成、糖类运输有着密切的关系铜是某些氧化酶的成分,能够促进离体根的生长锰参与植物的光合、呼吸代谢钼参与氮素的代谢氯是光合作用水光解的活化剂微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢的调节。第63页,共91页,星期日,2025年,2月5日组织培养的条件营养条件(培养基),组织培养的重要基质,不同植物的组织对营养有不同的要求,合适培养基才能成功。MS培养基:1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞设计,无机盐浓度较高,硝酸盐含量高,用于植物器官、花药、细胞的组培,有些培养基是由它演变而来。B5培养基:1968年由Galmborg为培养大豆根细胞设计,含有较低的铵盐,适合双子叶植物、木本植物第64页,共91页,星期日,2025年,2月5日干热消毒柜第23页,共91页,星期日,2025年,2月5日75%酒精喷雾器喷雾消毒器第24页,共91页,星期日,2025年,2月5日3)、无菌操作设备超净工作台第25页,共91页,星期日,2025年,2月5日二、设备、仪器超净工作台(一)设备第26页,共91页,星期日,2025年,2月5日1.紫外线灭菌灯2.日光灯3.工作台4.凳子5.搁物架6.窗7.推拉门8.缓冲间第27页,共91页
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