免疫沉淀试验.ppt

***********-+（三）免疫电泳示意图第63页，共78页，星期日，2025年，2月5日第64页，共78页，星期日，2025年，2月5日技术评价：1.分辨率较高2.仅定性3.扩散时间长，影响因素多，结果较难分析4.目前大量应用于纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常体液蛋白的识别与鉴定。第65页，共78页，星期日，2025年，2月5日抗原抗体在凝胶中直接发生沉淀反应，在适当位置形成抗原抗体复合物，经染色后，可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型原理区带电泳＋沉淀反应（四）免疫固定电泳第66页，共78页，星期日，2025年，2月5日左图为IgGκ型,中图为IgGλ型，右为正常SPGAMκλSPGAMκλSPGAMκλ（四）免疫固定电泳示意图第67页，共78页，星期日，2025年，2月5日原理：待检蛋白电泳固定剂及各类抗血清加于凝胶表面的泳道抗原与对应抗体反应沉淀漂洗染色某一抗原的存在?第68页，共78页，星期日，2025年，2月5日分辨率强，敏感度高，操作周期短，仅需数小时，结果易于分析。应用最常用于M蛋白的鉴定与分型，也用于尿中本周氏蛋白质的检测与κ、λ分型，脑脊液中寡克隆蛋白的检测与分型。优点（四）免疫固定电泳第69页，共78页，星期日，2025年，2月5日应用:M蛋白的鉴定和分型第70页，共78页，星期日，2025年，2月5日（五）交叉免疫电泳（六）自动化免疫电泳第71页，共78页，星期日，2025年，2月5日第四节免疫沉淀试验的临床应用

免疫浊度法：蛋白质的检测

如免疫球蛋白、补体、类风湿因子、C反应蛋白等

第72页，共78页，星期日，2025年，2月5日第五节临床常用免疫沉淀试验试剂方法特点一、胶乳增强的透射免疫比浊试验在全自动生化分析仪中的应用二、胶乳增强的透射免疫比浊试验在血凝固分析仪中的应用三、免疫固定电泳在半自动电泳仪中的应用四、散射免疫比浊试验在特种蛋白免疫分析仪中的应用第73页，共78页，星期日，2025年，2月5日第六节影响免疫沉淀试验的主要因素如温度、电解质、酸碱度等第74页，共78页，星期日，2025年，2月5日名词:沉淀反应简答:1.双向免疫扩散试验的应用2.免疫电泳技术的类型思考题第75页，共78页，星期日，2025年，2月5日1.根据海德堡曲线理论，下列说法不正确的是A抗原过量是产生钩状效应，沉淀物少B抗体过量时，沉淀物也少C抗原抗体比例适当时产生沉淀量最多D抗原过量导致测定失败E抗体过量导致测定失败第76页，共78页，星期日，2025年，2月5日2.双向扩散试验中沉淀环弯向抗原一方是A抗原分子量大B抗体分子量大C抗原抗体分子大致相等D抗原扩散快E抗体扩散快3.单向扩散实验中小分子抗原和较短时间扩散（24h）的结果处理宜用AMancini曲线BFahey曲线C海德堡曲线D直线E抛物线第77页，共78页，星期日，2025年，2月5日感谢大家观看*第78页，共78页，星期日，2025年，2月5日****************单向扩散试验上排为5个不同浓度的参考品；下排为患者血清，下排右2为异常病理血清一、单向免疫扩散试验第31页，共78页，星期日，2025年，2月5日应用IgG、IgA、IgM、C3、C4、转铁蛋白、抗胰蛋白酶、糖蛋白和前白蛋白等多种血浆蛋白的检测第32页，共78页，星期日，2025年，2月5日技术要点：1.制板2.打孔3.加样4.扩散二、双向免疫扩散试验第33页，共78页，星期日，2025年，2月5日第34页，共78页，星期日，2025年，2月5日第35页，共78页，星期日，2025年，2月5日1.判断抗原或抗体的存在以及估计相对含量2.分析抗原或抗体相对分子量二、双向免疫扩散试验第36页，共78页，星期日，2025年，2月5日3.分析抗原的性质二、双向免疫扩散试验第37页，共78页，星期日，2025年，2月5日第38页，共78页，星期日，2025年，2月5日4.滴定抗体的效价5.鉴定抗原或抗体纯度二、双向免疫