人教版高中生物选修一专题五《DNA和蛋白质技术》知识点归纳.pdfVIP

专题五DNA和蛋白质技术

课题一DNA的粗提取与鉴定

一、提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？

1.DNA不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA

不溶于酒精。

①DNA不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特0.14

NaCl法度(mol/L)

点？要使DNA溶解，须要运用什么浓度？要使DNA

析出，又须要运用什么浓度？

0.14mol/L时溶解度最小；较高浓度可使DNA溶解；0.14mol/L可

使DNA析出。

②溶解细胞中的DNA时，人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA

分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸储水，以稀释

NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精特（殊是

95%冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。

2.从理论上分析，预冷的乙醉溶液具有以下优点。

一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；

二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；

三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，削减断裂。

3.采纳DNA不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？

将DNA和蛋白质进一步分别。

,4.提取DNA还可以利用DNA对酶、高温柔洗涤剂的耐受性原理。利

用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值?

蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生

影响。温度值为60〜8(TC,因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不

会变性。

补充：DNA的变性是指DNA分子高温下解螺旋，其温度80C以上,

如PCR技术中DNA变性温度95℃o

5.洗涤剂提取DNA中有何作用？

洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从,而瓦解细胞膜。

6.当鉴定提取出的物质是否是DNA时，须要运用什么指示剂进行鉴

定？沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。

原理总结：通过利用不同浓度NaCl溶液溶

解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将

DNA与蛋白质分别开来，达到提纯的目的；最终利用二苯胺试剂鉴定提

取的物质是否是DNAO

二、试验材料的选取

不同生物的组织中DNA含量不同。选取材料时，应本着DNA含量

高、材料易得、便于提取的原则。

本试验用鸡血细胞做试验材料有两个缘由。

一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得；

二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作试验材料经常须要

匀浆和离心，对设备耍求较高，操作繁琐，历时较长。

鸡血细胞裂开以后释放出的DNA,简单被玻璃容器吸附，所以在提取过

程中为了削减DNA的损失，最好运用塑料的烧杯和试管盛放鸡细胞液。

三、裂开细胞，获得含DNA的滤液

1、若选用鸡和洋葱作试验材料，则怎样获得含DNA的滤液？

在鸡细胞液中加入肯定量蒸播水并用玻棒搅拌，过滤后收集滤液；

切碎洋葱，加入肯定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过滤后收集滤液。

2.为什么加入蒸储水能使鸡细胞裂开？

答：蒸储水对于鸡细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入

细胞内，使细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加