3.1 重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

第3章基因工程选择性必修3生物技术与工程科技探索之路：基因工程的诞生和发展第1节：重组DNA技术的基本工具第2节：基因工程的基本操作程序第3节：基因工程的应用第4节：蛋白质工程的原理和应用

抗虫棉的培育普通棉花会受到棉铃虫侵袭，造成减产甚至绝收。施用农药不仅提高生产成本，还会对农产品和环境造成污染。由于普通棉花中没有抗虫基因，而其他生物虽然有抗虫基因，但是与棉花存在生殖隔离，因此不能通过杂交育种培育出抗虫棉。普通棉花棉铃虫抗虫棉Bt抗虫蛋白基因导入（目的基因)(受体细胞)Bt抗虫蛋白

基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。生物体外(DNA)分子基因重组定向基因工程（重组DNA技术）1.概念：

1.DNA的基本组成单位相同(都是四种脱氧核苷酸)2.DNA都遵循碱基互补配对原则3.双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构表达的理论基础1.基因是控制生物性状的结构与功能单位2.遗传信息传递都遵循中心法则3.生物界几乎共用一套遗传密码重组DNARNA蛋白质性状复制转录翻译控制重组与复制的理论基础2.理论基础：

1944年艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可以在同种生物个体间转移。1961年尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。截至19666年，64个密码子均被破译成功。1970年科学家在细菌中发现了第一个限制性核酸内切酶（简称限制酶）1972年，伯格首先在体外进行了DNA的改造，成功构建了第一个体外重组DNA分子。1982年，第一个基因工程药物-重组人胰岛素被批准上市。基因工程药物成为世界各国研究和投资开发的热点。1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出了遗传物质自我复制的假说。1967年，科学家发现，在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力，并可以在细菌细胞间转移。20世纪70年代初，多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现。这些发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。1973年，科学家证明了质粒可以作为基因工程的载体，并实现了物种间的基因交流。至此，基因工程正式问世。1985年，穆里斯等人发明PCR,为获取目的基因提供了有效手段。科技探索之路基因工程的发展历程

在培育转基因生物时，既要在体外对含有所需基因的DNA分子“切割”、改造和“拼接”；又要将重组DNA分子导入生物体内，并使其表达。DNA双螺旋的直径只有2nm，对如此微小的分子进行操作，是非常精细的工作。科学家究竟用到了哪些“分子工具”？这些“分子工具”各具有什么特征呢？3.1重组DNA技术的基本工具剪切拼接导入表达

DNA重组技术的基本工具(至少3种“分子工具”)工具酶准确切割DNA分子的”分子手术刀”将DNA片段再连接起来的”分子缝合针”限制性内切核酸酶DNA连接酶将体外重组好的DNA分子导入受体细胞的”分子运输车”载体

一、限制性内切核酸酶（限制酶）---“分子手术刀”阅读教材P70-71，思考并回答下列问题：1.限制酶的来源？种类？特点？识别序列长度？切割结果？2.你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗？3.为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子？

主要从原核生物中分离纯化能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，（识别序列）并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。（切割位点）1.来源一、限制性内切核酸酶---“分子手术刀”GATTCGAATTC3355磷酸二酯键2.作用1234512345A专一性的体现

EcoRⅠ属名Escherichia首字母种加词coli头两个字母R型菌株从中分离的第一个限制酶例如：流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzae)d株中先后分离到3种限制酶，则分别命名为:HindIHindIIHindIII限制酶名字的由来EcoRⅠ：大肠杆菌（Escherichiacoli）R型菌株中分离出的第一个限制酶；SmaⅠ：粘质沙雷氏菌（Serratiamarcescens）中分离出的第一个限制酶。P72资料卡

EcoRⅠ一G-A-A-T-T-C一一C-T-T-A-A-G一HindⅢ一A-A-G-C-T-T一一T-T-C-G-A-A一SmaⅠ一G-G-G-C-C-C一一C-C-C-G-G-G一TaqⅠ一T-C-G-A一一A-G-C-T一3.特点(1)每一种限制酶都有各自特异性的识别序列①大多数限制酶：识别序列由6个核苷酸组成，如，限制酶EcoRⅠ、SmaⅠ②少数限制酶：识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。(