化妆品 抗氧化活性的评价-细胞评价法.pdfVIP

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ICS71.100.70

CCSY42

GDCA

广东省化妆品学会团体标准

T/GDCA012—2021

化妆品抗氧化活性的评价细胞评价法

Cosmetics-DeterminationofAntioxidant-CellularMethods

(征求意见稿)

2022.6.15

(本草案完成时间:)

在提交反馈意见时,请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

广东省化妆品学会发布

T/GDCA012—2021

化妆品抗氧化活性的评价细胞评价法

1范围

本文件规定了运用细胞体系评价化妆品及其原料抗氧化活性的方法及操作。

本文件适用于化妆品(膏霜、乳液、凝胶、精华等)及化妆品原料包括天然提取物等抗氧化活性的

评价。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

抗氧化能力Antioxidantcapacity

某些物质可以通过直接作用于自由基,或通过间接消耗掉可生成自由基的物质,而达到有效抑制自

由基氧化的反应。

活性氧ReactiveOxygenSpecies(ROS)

指含氧的化学反应性化学物质,泛指氧来源的自由基和非自由基,包含了超氧阴离子(O·-)、过

2

1

氧化氢(HO)、羟基自由基(OH·)、臭氧(O)和单线态氧(O)。

2232

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

ROS:活性氧(ReactiveOxygenSpecies)。

CAA:细胞抗氧化活性(CellularAntioxidantActivity)。

5评价方法

细胞抗氧化活性试验(CAA)

5.1.1方法原理

荧光探针2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)可穿过细胞膜进入细胞,在细胞里被酯酶分解形

成二氯荧光素,二氯荧光素可被2,2-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(AAPH)诱导产生的自由基氧化,生成

具有荧光的物质,其荧光强度与细胞内活性氧的水平具有相关性。抗氧化物质可在细胞膜外部结合氧自

由基而阻止其进入细胞,或者在细胞膜内部清除氧自由基而阻断荧光物质的生成,所对应的荧光强度减

弱程度,可以反映受试物质的抗细胞氧化的程度。

5.1.2试剂与材料

所需的试剂与材料如下:

——EMEM培养基

——甲醇

——胎牛血清(FBS)

——胰酶(0.25%-EDTA)

——2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA,CAS:4091-99-0)

——2,2-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(AAPH,CAS:2997-92-4)

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T/GDCA012—2021

——无水乙醇

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