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ICS67.120
DB34
X18
安徽省地方标准
DB34/T2817—2017
禽类产品中杆菌肽残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
Methodforthedeterminationofbacitracinresiduesinpoultryproduct-LC-MS/MS
method
安徽省质量技术监督局发布
DB34/T2817—2017
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由安徽省检验检疫科学技术研究院提出。
本标准由安徽省动植物检验检疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:安徽省检验检疫科学技术研究院、合肥市动物卫生监督所。
本标准主要起草人:宋伟、韩芳、吕亚宁、胡艳云、杨磊、周典兵、丁磊、盛旋、郑平。
I
DB34/T2817—2017
禽类产品中杆菌肽残留量的测定液相色谱-串联质谱法
1范围
本标准规定了禽类产品中杆菌肽残留量的液相色谱-串联质谱检测方法。
本标准适用于鸡肉、鸭肉、鸡肝、鸭肝等禽类产品中杆菌肽残留量的测定和确证。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法原理
样品中杆菌肽残留用0.1mol/LNa2EDTA-Mcllvaine缓冲液(pH=4.0±0.05)提取,经离心过滤后,
上清液用HLB固相萃取柱净化,液相色谱串联质谱仪测定,外标法定量。
4.8柠檬酸溶液:0.1mol/L。称取21.01g柠檬酸(4.5),用水溶解,定容至1000mL。
4.9磷酸氢二钠溶液:0.2mol/L。称取28.41g磷酸氢二钠(4.6),用水溶解,定容至1000mL。
4.10Mcllvaine缓冲溶液:将1000mL0.1mol/L柠檬酸溶液(4.7)与625mL0.2mol/L磷酸氢二
钠溶液(4.8)混合,必要时用氢氧化钠或盐酸调节pH=4.0±0.05。
4.11Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液:0.1mol/L。称取60.5g乙二胺四乙酸二钠(4.4)放入1625mL
Mcllvaine缓冲溶液(4.9)中,使其溶解,摇匀。
4.120.1%甲酸甲醇溶液:称取1mL甲酸于装有800mL甲醇的1L容量瓶中,用甲醇定容至1000mL。
4.13OasisHLB固相萃取柱:500mg,6mL,或相当者。使用前分别用5mL甲醇和10mL水预处理,
保持柱体湿润。
4.14杆菌肽标准物质:杆菌肽A(CAS:1505-87-4),纯度均大于等于92%,以下杆菌肽标准均以杆
菌肽A计。
1
DB34/T2817—2017
4.15杆菌肽标准储备溶液:准确称取适量的杆菌肽A(4.13)于50mL容量瓶中,用0.1%甲酸甲醇
溶液配制成0.1mg/mL标准储备溶液。储备在2℃~4℃保存,可用3个月。
4.16杆菌肽标准工作液:根据需要吸取适量杆菌肽标准储备溶液(4.14),配制成适用浓度的标准工
作液。该溶液在0~4℃冰箱中保存。
4.170.22μm滤膜,有机系。
4.18滤纸:快速。
5仪器和设备
5.1液相色谱串联四级杆质谱仪或相当者,配电喷雾离子源。
5.2分析天平:感量为0.01g。
5.3组织捣碎机。
5.4均质器:10000r/min。
5.5高速冷冻离心机:转速不低于8000r/min。
5.6pH计:测量精度±0.02。
5.7固相萃取装置:带真空泵。
5.8氮吹浓缩仪。
5.9涡旋混合器。
6试样制备与保存
制样操作过程中应防止样品受到污染或残留物含量发生变化。
从所取全部样品中取出约500g,用组织捣碎机充分绞碎均匀,装入洁净容器中,密封,并标明标
记,于-18℃冰箱冷冻存放。
7测定步骤
7.1提取
称取均质样品5g(精确至0.01g),置于50mL具塞塑料离心管内,加入20mL
Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液,以10000r/min高速均质1min后,4℃下以8000r/min的速度离心
10min,将上清液经滤纸过滤倾入另一100mL具塞塑料离心管内待净化,再用20mL
Na2EDTA-Mcllva
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