动态光散射简易操作手册.pdfVIP

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激光动态光散射简易操作手册

1、待测样品浓度:对于14kDa的蛋白浓度一般为1mg/ml;28kDa一般为0.5mg/ml。

依此类推

2、样品池为14μl左右,因此一般建议准备20μl。

3、样品一般12,000rpm离心10min,轻取上清。

4、用水冲洗微量取液器和样品池。样品池非常昂贵,请务必小心!

5、微量取液器的针头尽量避免刮到样品池的底部和侧壁。

6、某些样品(高浓度或粒径较大)光散射强度过高时,仪器会出现自保护提示

7、对样品成份及大小需有较好的了解,以利于分析。

一、开机。打开主机和温控两个模块的电源

双击图标,进入程序,显示

可以打开已存在的方法和数据,或可以新建一个方法

二、联机

点击Hardware后点击connect,连接上仪器

Connect后图标变成绿色。选中Parameters,更改其中的相关参数Instrument、

Solvent、Sample。

Instrument:主要参数是激光强度和温度。

Solvent:不通的buffer的折光率和粘连系数是不一样的。此项中选择好Buffer

后参数会自动调整。

Sample:考虑样品的形状。

三、测定

参数设定后,点击即可开始检测。当采集到足够的数据时,再点击一次则数

据采集结束。

四、数据分析

红色数据为超出设定范围的数据,在分析时不采用。一般采集10个显示黑色有

效数据。

Baseline:一般样品的设定偏差为1±0.003,对于纯度非常高的样品可以设置

更小如1±0.001。

SOS:对于均一性不是很好的样品可以不考虑,对于一般较好的样品设定为100。

Intensty:光散射强度。对于均一性较好的样品,此项数据变化幅度较小。

Mvv-R:推测的分子量。

备注:数据过滤。在数据界面,右键,DataFilter。

对于超出偏差范围的数据则显示为红色,并在后期分析中不参与分析。

另外对于某个光散射强度有较大偏动的数据也可以手动去除,右键,Mark。例

如,第3行数据。Mark后即为红色。对于红色数据可以Unmark。

点击图标为分析图

图和数据均可以Copy出来

Peak:每个Peak代表一种物质

R:粒径

%pd:均一性。15以下为非常均一,15~30为一般均一。

%Mass:百分含量

R和%Pd为关注的主要数据。

备注:

对于粒径为0,但是%Mass却是100,往往是由于溶剂造成的,可以忽略;粒

径特别大,但是%Mass却很小的,往往是由于灰尘或溶解的气体造成的,可以

忽略。

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