猪痘病毒荧光定量PCR检测技术.pdfVIP

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ICS

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团体标准

T/CVMAXXXXX—XXXX

猪痘病毒荧光定量PCR检测技术

Real-TimeFluorescentQuantitativePCRDetectionTechnologyforSwine

PoxVirus

(征求意见稿)

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

T/CVMAXXXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由浙江农林大学提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件起草单位:

本文件主要起草人:

1

T/CVMAXXXXX—XXXX

猪痘病毒荧光定量PCR检测技术

1范围

本文件规定了猪痘病毒荧光定量PCR检测技术的内容、步骤、方法及注意事项的要求

本文件适用于猪痘病毒或疑似猪鸽痘病毒感染样品的荧光定量PCR检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,

仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本

文件。

《中华人民共和国动物防疫法》

《中华人民共和国生物安全法》

《病原微生物实验室生物安全管理条例》

《动物病原微生物菌(毒)种保藏管理办法》

《动物病原微生物实验活动生物安全要求细则》

《兽医实验室生物安全要求通则》(NY/T1948-2010)

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

猪痘病毒SwinePoxVirus

属于痘病毒科(Poxviridae)猪痘病毒属(Suipoxvirus)的DNA病毒,专一性感染猪科动物。该病

毒通过直接接触或节肢动物媒介传播,引起猪痘临床病症,特征为皮肤出现红斑、丘疹及脓疱性病变,

常伴随发热与食欲减退。猪痘病毒具有宿主特异性,不感染人类,是影响生猪养殖业的重要病原体之一。

3.2

荧光定量PCRFluorescenceQuantitativePolymeraseChainReaction

一种基于实时荧光信号监测的核酸扩增技术,通过荧光染料或序列特异性探针标记靶标DNA,动态

检测扩增过程中荧光强度的变化,结合标准曲线或阈值循环数(Ct值)对初始模板核酸进行定量分析。

该方法具有高灵敏度和特异性,广泛应用于病原体检测、基因表达分析等领域。

4符号和缩略语

下列符号和缩略语适用于本文件。

2

T/CVMAXXXXX—XXXX

PCR:聚合酶链式反应。

Ct值:PCR扩增过程中扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数。

SWPV:猪痘病毒。

5原理

猪痘病毒p35蛋白具有种属特异性和抗原保护性,生物信息学筛选出该基因在SPV中保守序列片段序

列,利用软件针对该序列设计引物和探针,根据猪痘病毒荧光定量PCR检测结果对SPV进行检测鉴定。

6组织或

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