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实验11植物的组织培养

植物组织培养过程外植体愈伤组织根、芽或胚状体植物体脱分化再分化(高度分化)(未分化状态)一、基础知识

什么叫外植体?外植体愈伤组织胚状体或根、芽植物体脱分化再分化离体的植物器官组织或细胞可选什么做外植体？为什么?植物几乎所有的组织（根、茎、叶、花药、子房、幼胚、形成层等组织）及细胞都可做外植体。幼嫩的细胞易脱分化。植物细胞都具有全能性。胚状体是指什么?排列疏松而无规则,高度液泡化的薄壁细胞，未分化状态。愈伤组织是指什么?

外植体愈伤组织胚状体或根、芽植物体脱分化再分化植物组织培养技术的理论基础是什么？植物细胞的全能性所有生物细胞的全能性是否一致？(1)植物细胞动物细胞；(2)受精卵生殖细胞体细胞；(3)不同种类植物细胞全能性的表达程度不同；(4)同种植物不同基因型个体间细胞全能性的表达程度不同。

外植体愈伤组织胚状体或根、芽植物体脱分化再分化植物细胞表现出全能性的条件是什么？离体提供一定的营养物质、激素其它适宜的外界条件

2、植物组织培养的培养基你认为培养基应有哪些成分?培养基的成分矿质元素蔗糖植物激素维生素有机添加物琼脂等外植体愈伤组织胚状体或根、芽植物体脱分化再分化培养基培养基

MS培养基含有十几多种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表)Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的。能满足植物细胞的营养和生理需要，适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。MS培养基

MS培养基的配制:按比例分别取适量各种成分的母液，加入烧杯，称取适量的蔗糖和琼脂，加适量蒸馏水并加热使琼脂溶解，按照需要的浓度分别加入激素，用1mol/LNaOH和1mol/LHCl溶液调节pH至5.8~6.0。灭菌。

3、植物激素对植物组织培养的影响调控芽和根的发生细胞分裂素/生长素大致相等时，愈伤组织继续生长而不分化细胞分裂素/生长素比例高，有利芽的发生细胞分裂素/生长素比例低，有利根的发生外植体愈伤组织胚状体或根、芽植物体脱分化再分化无菌培养基无菌培养基实验中使用的生长素是人工合成的萘乙酸（NAA），细胞分裂素也是人工合成的苄基腺嘌呤（BA）

MS培养基+相对较多的细胞分裂素（BA）+相对较少的生长素（NAA）→→发芽培养基（长丛状苗）。01MS培养基+相对较多的生长素（NAA）→→生根培养基。02

配制培养基并灭菌取材并消毒接种至发芽培养基转入生根培养基炼苗并移栽（至草炭土或蛭石中）定植（栽培至土中）丛状苗二、植物组织培养的基本过程外植体的消毒：流水冲洗20分钟放入70﹪酒精浸泡10min在5%的次氯酸钠溶液中浸泡5分钟在另一5%的次氯酸钠溶液中浸泡5分钟无菌水冲洗2~3次，无菌吸水纸吸干

配制培养基并灭菌取材并消毒接种至发芽培养基转入生根培养基炼苗并移栽（至草炭土或蛭石中）定植（栽培至土中）丛状苗炼苗与移栽炼苗：先在外界环境闭瓶锻炼3天，再开瓶锻炼3天（以培养基上开始长出菌为宜）。移栽：去净培养基，可先在灭过菌的草炭土或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。

01影响植物组织培养的因素有哪些？02植物的材料03培养基04植物激素05pH值06外界因素（温度，光照，通气状况，材料处理等）四、问题讨论

不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度？不同植物、不同组织的生根和生芽对生长素和细胞分裂素浓度的需求是不一样的。因此，不可贸然使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度。可以参考已发表文献上成熟的经验，也可自己探索。本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成激素在植物中没有相应的分解它的酶，所以作用和存在的时间长，作用效果明显。

切取

接种

形成愈伤组织

愈伤组织在不同培养基上，分化形成芽或根，进而形成小苗(试管苗)。形成试管苗

试管苗大规模培养

移栽

下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答：醋可用大米为原料经三步发酵来制作：熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成???①???(填中间产物)，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用???②????(填淀粉指示剂)来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。③??菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，发酵瓶不应完全密闭的主要原因是??④???。⑤???菌将乙醇转化成乙酸，这一过程??⑥???氧气。123452009浙江高考1