Annexin V-APC 7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒.pdf

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AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒

(AnnexinV-APC/7-AADApoptosisDetectionKit,20Tests)

保存方法：本试剂盒中所有组分均在4℃保存，勿冰冻。

产品编号产品名称包装

AnnexinV-APC/7-AAD需避光保存。一年有效。

AnnexinV-APC/7-AAD细

JX18-20T20次

胞凋亡检测试剂盒使用说明：

一、仪器参数调节：

产品简介：

6

1.收集1~3×10细胞，用预冷PBS离心洗涤2次，弃上清。

AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用荧光素APC标记

2.加入300μl的1×Bindingbuffer重悬细胞，等分成3管。其中一管

的AnnexinV作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，结合7-AAD可

为空白对照，两管为单染管。

区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。

3.一个单染管加入5μLAnnexinV-APC，另一个单染管加入10μL7-AAD

Annexin-V（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖

染液，轻混匀后室温避光反应15min。

性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。在正常活细胞中，磷脂酰

4.在流式细胞仪上，用空白对照管调节FSC、SSC和荧光通道电压，

丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡

并在此电压条件下，用2个单染管调节荧光通道的补偿。

的细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外

二、样品检测：

环境中。Annexin-V可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞的胞

1.收集细胞：

膜结合。

对于悬浮细胞，用预冷PBS，300g，4℃离心5min收集细胞；

7-AAD是一种核酸染料，同PI有着相似的荧光特性，但其发射