分解纤维素的微生物的分离知识点.pptVIP

关于分解纤维素的微生物的分离知识点第1页，共14页，星期日，2025年，2月5日纤维素酶：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素C1酶Cx酶纤维二糖葡萄糖苷酶葡萄糖第2页，共14页，星期日，2025年，2月5日甲乙在2支20mL的试管中，分别放入1×6cm的滤纸条，再分别加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液10mL、11mL。在加入10mL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶（70~80U/mL）。将二支试管固定在50mL的锥形瓶中，在摇床上以140r/min的转速振荡反应1h，观察结果。4、纤维素酶活性的测定实验：第3页，共14页，星期日，2025年，2月5日.纤维素分解细菌的筛选：1.方法：刚果红染色法这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。2.原理：第4页，共14页，星期日，2025年，2月5日土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落二、实验设计（此步可以省略）第5页，共14页，星期日，2025年，2月5日2、选择培养的操作方法将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1-2d，直至培养液变混浊。吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变混浊。选择培养（富集培养）增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需要的微生物。1、目的：第6页，共14页，星期日，2025年，2月5日刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红第7页，共14页，星期日，2025年，2月5日为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______发酵和______发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________含量进行定量测定。课题延伸发酵产纤维素酶液体固体葡萄糖第8页，共14页，星期日，2025年，2月5日碳源氮源生长因子无机盐水微生物需要的五大类营养要素物质（一）微生物需要的营养物质及功能第9页，共14页，星期日，2025年，2月5日概念来源常见的生长因子微生物生长不可缺少的微量有机物酵母膏、蛋白胨、动植物组织的提取液维生素、氨基酸、碱基等生长因子思考是否培养所有微生物的培养基中都需要加生长因子？第10页，共14页，星期日，2025年，2月5日1、碳源2、自养型微生物利用无机碳源，异养型微生物利用有机碳源；有机碳源：如糖类无机碳源：如CO25自养型微生物的能源是光能或无机物氧化释放的化学能；异养型微生物的能源是和碳源一样（有机碳源）3、自养型微生物利用无机氮源，异养型微生物可能利用无机氮源也可能利用有机氮源4、有机碳源也是异养型微生物的主要能源第11页，共14页，星期日，2025年，2月5日**