3.1重组DNA技术的基本工具课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

（1930.9.7-2021.5.22）一位让中国人“把饭碗端在自己手里”的人

一粒稻米就是一颗“救命药”武汉大学教授杨代常和他的“造血水稻”一位让中国人“把生命线握在自己手里”的人

人体细胞血清白蛋白血清白蛋白基因普通水稻血清白蛋白切割拼接？重组DNA造血水稻的培育思路：武汉大学教授杨代常和他的“造血水稻”思考：血清白蛋白本由人的肝细胞合成，为何水稻也能“生产”人的血清白蛋白？一位让中国人“把生命线握在自己手里”的人DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，需要专门的“分子工具”。

第三章基因工程第一节重组DNA技术的基本工具授课教师：张慧

任务一：寻找“基因剪刀”资料一：人类基因组包含约2万-2.5万个基因，总长度达30亿对碱基。杨代常团队是如何把人血清白蛋白基因从庞大的DNA分子上切割下来的呢？这种“基因剪刀”是什么？其需要具备哪些特性？自主学习1阅读P71的一、二段，填写导学案上的相关内容限制酶来源限制酶种类作用特点作用结果问题1

任务一：寻找“基因剪刀”来源种类作用特点作用结果主要从原核生物中分离纯化而来数千种——限制性内切核酸酶（简称：限制酶）阅读课本P71的相关内容，填写导学案上的相关内容①能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。②大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

任务一：寻找“基因剪刀”——限制性内切核酸酶（简称：限制酶）限制酶作用部位

任务一：寻找“基因剪刀”——限制性内切核酸酶（简称：限制酶）EcoRI5533黏性末端中轴线5533SmaI平末端

任务一：寻找“基因剪刀”——限制性内切核酸酶（简称：限制酶）阅读课本P71的相关内容，填写导学案上的相关内容来源种类作用特性作用结果主要从原核生物中分离纯化而来数千种产生黏性末端或平末端①能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。②大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

任务一：寻找“基因剪刀”——限制性内切核酸酶（简称：限制酶）模拟活动一:切割目的基因【材料】：剪刀（代表限制酶）、写有碱基序列的纸带（代表DNA片段）请根据所给的材料，选择合适的限制酶将血清白蛋白基因（目的基因）从DNA片段上剪切下来。

任务一：寻找“基因剪刀”——限制性内切核酸酶（简称：限制酶）思考：同种限制酶切割产生的黏性末端相同，不同限制酶切割产生的黏性末端是否一定不同？结论：不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端。（1）请写出限制酶SpeⅠ、XbaⅠ切割形成的黏性末端。SpeⅠ：XbaⅠ：

任务二：选择“基因运输车”——载体问题2杨代常团队获得了足量的血清白蛋白基因后，能否直接将其导入水稻细胞？不能，游离的DNA进入受体细胞后，一般会被分解，因此，获取目的基因后还需要借助载体将其导入水稻细胞。结论2

任务二：选择“基因运输车”——载体质粒、将外源基因送入受体细胞,在受体细胞内对目的基因进行大量复制。1.作用：2.种类：是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA。真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。动植物病毒、噬菌体

任务二：选择“基因运输车”——载体3.载体需具备的条件：（3）具有特殊的标记基因（4）对受体细胞无害、易分离能使目的基因稳定存在且数量可扩增供外源DNA片段（基因）插入其中如氨苄青霉素抗性基因，便于重组DNA分子的筛选避免受体细胞受到损伤（2）稳定存在并能自我复制或整合到受体DNA上（1）有一个至多个限制酶切割位点

模拟活动二：切割质粒【材料】：剪刀（代表限制酶）、写有碱基序列的纸圈（代表质粒）请选择合适的限制酶将下面质粒进行“切割”任务三：连接“基因片段”——DNA连接酶BamHI

任务三：连接“基因片段”1.作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。2.种类：类型来源E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶功能大肠杆菌T4噬菌体恢复磷酸二酯键只能连接黏性末端能连接黏性末端和平末端(效率较低)相同点不同点阅读课本P72第一段的内容，归纳并填写下表E