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分子生物学实验技术知识要点

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1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。

2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。

一、选择题

1.下列哪项不是PCR技术的特点？

a.高效性

b.灵活性

c.特异性

d.稳定性

2.DNA测序中常用的Sanger测序法是基于以下哪个原理？

a.DNA聚合酶链反应

b.DNA合成酶活性

c.DNA分子杂交

d.DNA片段大小差异

3.以下哪种核酸分子杂交技术可以用来检测基因突变？

a.Southernblot

b.Northernblot

c.Westernblot

d.Southernblot和Northernblot

4.逆转录PCR（RTPCR）的目的是什么？

a.从RNA合成cDNA

b.从cDNA合成RNA

c.从DNA合成cDNA

d.从RNA合成DNA

5.限制性内切酶识别的序列特点是？

a.无规律性

b.有规律性

c.单一性

d.多样性

6.以下哪项不是质粒的常见性质？

a.自我复制

b.高拷贝数

c.可选择性标记

d.高稳定性

7.以下哪种方法是蛋白质纯化的常用技术？

a.凝胶电泳

b.离子交换层析

c.膜分离

d.以上都是

8.以下哪种技术可以用来检测蛋白质的表达水平？

a.Westernblot

b.Northernblot

c.Southernblot

d.DNA测序

答案及解题思路：

1.答案：d.稳定性

解题思路：PCR技术以其高效性、灵活性和特异性著称，但并不以稳定性见长。稳定性通常与实验条件、反应体系等因素有关。

2.答案：d.DNA片段大小差异

解题思路：Sanger测序法是通过链终止法测序，利用不同终止子产生不同长度的DNA片段，通过电泳分离来测序。

3.答案：a.Southernblot

解题思路：Southernblot用于检测特定DNA序列，通过探针与目的DNA杂交，可以检测基因突变。

4.答案：a.从RNA合成cDNA

解题思路：RTPCR通过逆转录酶将RNA转化为cDNA，以便于后续的PCR扩增。

5.答案：b.有规律性

解题思路：限制性内切酶识别特定的DNA序列，这些序列具有规律性，以便酶能够特异性地切割。

6.答案：d.高稳定性

解题思路：质粒通常具有自我复制、高拷贝数和可选择性标记等性质，但并不一定具有高稳定性。

7.答案：d.以上都是

解题思路：蛋白质纯化可以通过多种技术实现，包括凝胶电泳、离子交换层析和膜分离等。

8.答案：a.Westernblot

解题思路：Westernblot用于检测蛋白质的表达水平，通过特异性抗体与目标蛋白质结合，并通过电泳和显色来检测。

二、填空题

1.PCR技术中，变性、退火和延伸三个步骤的英文缩写分别是______、______和______。

答案：Denaturation、Annealing、Extension

解题思路：PCR（聚合酶链反应）的基本步骤包括变性、退火和延伸。变性步骤的英文缩写是Denaturation，退火步骤的英文缩写是Annealing，延伸步骤的英文缩写是Extension。

2.DNA聚合酶在PCR过程中的作用是______。

答案：催化DNA的合成

解题思路：DNA聚合酶在PCR过程中负责在引物的指导下，从引物的3端开始合成新的DNA链，因此其作用是催化DNA的合成。

3.逆转录酶在逆转录PCR中的作用是______。

答案：将RNA模板逆转录成cDNA

解题思路：逆转录酶是一种能够将RNA模板逆转录成互补DNA（cDNA）的酶，在逆转录PCR中，它将RNA模板转化为cDNA，以便进行后续的PCR扩增。

4.限制性内切酶识别的序列称为______。

答案：限制性酶切位点

解题思路：限制性内切酶能够识别并切割双链DNA中的特定序列，这些序列被称为限制性酶切位点。

5.质粒是一种______，常用于分子生物学实验中。

答案：小型环状DNA分子

解题思路：质粒是一种独立于染色体的小型环状DNA分子，它可以在细胞内自主复制，常用于分子生物学实验中作为载体。

6.Westernblot是一种______技术，用于检测蛋白质的表达水平。

答案：蛋白质印迹

解题思路：Westernblot是一种蛋白质印迹技术，通过电泳分离蛋白质，然后利用抗体检测特定蛋白质的表达水平。

7.Southernblot是一种______技术，用于检测目的DNA