自噬流检测方法的研究与应用.docxVIP

自噬流检测方法的研究与应用

目录

一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2自噬现象概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3自噬流检测的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.4国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

二、自噬流检测方法原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.1自噬流形成机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.2检测方法分类．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2.1光学显微镜检测法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.2.2电子显微镜检测法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2.3流式细胞术检测法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2.4活细胞成像技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.2.5分子生物学检测法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.2.6细胞器分离技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

2.3各种方法的原理及特点比较．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

三、常用自噬流检测方法详解．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

3.1基于荧光染料的检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

3.1.1LAMP染料结合检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

3.1.2探针分子标记技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

3.2基于电子显微镜的观察方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

3.2.1线粒体形态学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

3.2.2自噬小体识别．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.3基于流式细胞术的分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.3.1绿色荧光蛋白标记．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

3.3.2激光扫描共聚焦显微镜技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

3.4基于活细胞成像技术的动态观察方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.4.1自噬流动态追踪．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.4.2细胞内结构变化监测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

3.5基于分子生物学技术的定量分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.5.1自噬相关基因表达检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

3.5.2自噬通路关键蛋白分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

3.6基于细胞器分离技术的精确定量方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

3.6.1自噬溶酶体分离纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

3.6.2自噬流成分分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

四、自噬流检测方法的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

4.1疾病诊断与监测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．58

4.1.1自噬流与肿瘤发生发展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

4.1.2自噬流在神经退行性疾病中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

4.1.3自噬流与自身免疫性疾病的关系．．