动物细胞融合与单克隆抗体课件课件.pptVIP

1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同Ｂ第30页，共45页，星期日，2025年，2月5日2.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③C第31页，共45页，星期日，2025年，2月5日植物体细胞杂交的意义：打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。第32页，共45页，星期日，2025年，2月5日关于动物细胞融合与单克隆抗体课件第1页，共45页，星期日，2025年，2月5日动物细胞融合与单克隆抗体第2页，共45页，星期日，2025年，2月5日1、定义：两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。也称细胞杂交一、动物细胞融合杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞成为杂交细胞。第3页，共45页，星期日，2025年，2月5日2、诱导融合的因素生物法：灭活的病毒诱导融合.(病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。)化学法：聚乙二醇PEG诱导融合.物理法：电激融合病毒颗粒黏附细胞表面细胞膜连接细胞膜被病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细胞不能，因为不灭活的病毒会感染细胞。第4页，共45页，星期日，2025年，2月5日(三)动物细胞融合的应用1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。(至今种间、属间、科间，甚至动物与植物之间的细胞融合已获得成功。)2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。3.为制造单克隆抗体开辟了新途径。鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡、人—胡萝卜等第5页，共45页，星期日，2025年，2月5日二、单克隆抗体什么是抗体？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴细胞（浆细胞）能产生抗体。第6页，共45页，星期日，2025年，2月5日（一）获得抗体的传统方法1、把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需的抗体。2、缺点：产量低，纯度低，特异性差。第7页，共45页，星期日，2025年，2月5日第8页，共45页，星期日，2025年，2月5日人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念用单个B淋巴细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。第9页，共45页，星期日，2025年，2月5日2、怎样才能获得单克隆抗体？提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？第10页，共45页，星期日，2025年，2月5日如何大量生产单克隆抗体？利用B淋巴细胞产生抗体的功能。利用肿瘤细胞无限增殖的特性。利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有B淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞。利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。第11页，共45页，星期日，2025年，2月5日注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体第12页，共45页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的制备第13页，共45页，星期日，2025年，2月5日（二）单克隆抗体的制备第14页，共45页，星期日，2025年，2月5日动物特异性免疫分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意B淋巴细胞是一个系列。（B1,B2,B3,---Bn）细胞融合——三种融合方式:（BB;BG;GG）第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞（只有BG