实验动物质量控制PPT课件.ppt

2.红细胞凝集试验（检测红细胞抗原和某些H-2抗原）3.细胞毒试验（检测H-2抗原、Ia抗原和白细胞抗原）其它免疫学方法*生化标记法依据生化基因的产物（绝大多数是异构蛋白和酶）在特定电场内携带的电荷不同，采用电泳的方法将它们区分，这些电泳带型称之为生化基因标记。我们可以根据电泳带型即蛋白质的表现型推断被检测小鼠的基因型，建立各种近交系的遗传概貌，定期对它们进行遗传监测。常规遗传监测中的首选方法**K：肾脏e：溶血素或红细胞l：肝脏s：脾脏p*限制性片段长度多态性DNA(RFLP)随机扩增多态性DNA(RAPD)微卫星DNA标记线粒体DNA(mtDNA)多态性单核苷酸多态性分析(SNPs)基因芯片分析分子生物学遗传监测方法*分子标记相对于传统的生化标记具有操作简便,多态性丰富等优点,如何推动高效的遗传多态性检测手段应用于实验动物管理中去,是我们实验动物学工作者应该思考的问题。*（二）封闭群实验动物遗传检测1、目的：对封闭群动物的遗传检测，就是对动物群体的遗传结构进行分析。其目的是通过遗传分析了解动物群体的遗传概貌，得知不同种动物间或动物不同群体间的遗传差异、遗传距离、在进化中的关系等。它对动物的分类，品系资源的保存、开发和利用，对动物的选种、选育具有指导意义。还可确保群体的杂合性和基因库的完整。需计算基因频率2、方法：（1）生化标记检测通过计算基因频率来了解基因平衡状态。（2）染色体标记检测了解一些染色体的带型多态性。（3）形态学进行下颌骨形态的多变量分析。*六、遗传质量标准

1．近交系动物的遗传质量标准

近交系动物必须符合以下要求：

(1）具有明确的品系背景资料，包括品系名称、近交代数、遗传组成、主要生物学特性等，并能充分表明新培育的或引种的近交系动物符合近交系定义的规定。(2）用于近交系保种及生产的繁殖系谱及记录卡应清楚完整，繁殖方法科学合理。

(3）经遗传检测（生化标记基因检测法，皮肤移植法，免疫标记基因检测法等）质量合格。

*2．封闭群动物的遗传质量标准

由于封闭群动物的遗传组成不如近交系稳定，目前尚没有统一的质量标准，但基本要求如下：

(1）作为繁殖用原种的封闭群动物必须遗传背景明确，来源清楚，有较完整的资料（包括种群名称、来源、遗传基因特点及主要生物学特性等）。

(2）保持封闭群条件，无选择，以非近亲交配方式进行繁殖，每代近交系数上升不超过1％。

(3）具有一定的种群规模，保持封闭群的主要生物学特性。*思考题：1、实验动物微生物与寄生虫检测的程序？2、根据微生物和寄生虫控制我国实验动物分为哪几个等级？3．实验动物按遗传学是如何分类的？4．简述实验动物（近交系、亚系、封闭群、杂交群）命名原则是什么？5．为什么要进行实验动物的遗传监测？遗传监测的方法主要有哪些？ *取样要求与监测规则：1.普通动物、清洁级动物和无特定病原体动物每三个月至少检测一次。2.无菌动物每年至少检测一次。3.每2-4周检测一次粪便标本。*实验动物不同生产繁殖单元取样数量群体大小，只取样数量100100—1505005只10只20只每个隔离器检测2只取样应在每一生产繁殖单元的不同方位（如四角和中央）选取动物。动物的送检容器应按动物级别要求编号和标记，包装好后安全送达检测实验室，并附送检测单，写明送检动物的品种品系、级别、数量和检测项目。*检测项目的分类

国标对必须检测和必要时检测作了限定性说明：“必须检测项目：是指在进行实验动物质量评价时必须检测的项目。必要时检测项目：是指从国外引进实验动物时、怀疑有本病流行时、申请实验动物生产许可证和实验动物质量合格证时必须检测的项目”。*监测方法：1.实验动物病毒检测：1）血清学诊断：血凝抑制试验（HI）；酶联免疫吸附试验（ELISA）。2）病原学检查：接种细胞培养物观察CPE出现（鼠痘、鼠肝炎）；血吸附试验（仙台病毒）；免疫酶试验（LCM病毒）。连续三次传代未有病毒迹象为阴性。接种敏感动物，观察发病、抗体产生、病理改变、接种动物病毒再分离。动物组织细胞传代培养。*3）病毒颗粒、抗原和核酸的检出光镜检查病理改变或包涵体的存在。电镜检查组织内或排泄物中的病毒颗粒。PAGE、PCR检查病毒核酸。免疫法检查组织内、排泄物中的病毒抗原。*2.实验动物细菌检测：1）正常动物主要取气管或鼻咽分泌物和盲肠内容物作细菌培养。2）发病动物对发生病变的各组织和脏器做细菌检查。3）细菌监测多采用病原学方法。*3.