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动物性食品及牛羊奶中地塞米松和倍他米松残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了猪、牛、羊和鸡组织（肌肉、肝脏和肾脏）及牛羊奶中地塞米松和倍他米松残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。

本文件适用于猪、牛、羊和鸡组织（肌肉、肝脏和肾脏）及牛羊奶中地塞米松和倍他米松残留量的检测，其他畜禽产品的检测可以参照执行。

2规范性引用文件

下列文件中内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中药物经酶解后用乙腈提取，提取液进行液-液-液三相体系净化、碳酸钠溶液碱洗净化和硅胶柱固相萃取进行净化，液相色谱-串联质谱仪测定，基质匹配内标法定量。

5试剂与材料

以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。

5.1.2正己烷（C6H14）。

5.1.3乙酸乙酯（CH3COOC2H5）。

5.1.4丙酮（CH3COCH3）。

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5.1.5乙酸铵（CH3COONH4）。

5.1.6乙酸（CH3COOH）。

5.1.7甲酸（HCOOH）：色谱纯。

5.1.8碳酸钠（Na2CO3）。

5.1.9β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶(β-glucuronidase/arylsulfatase）：β-葡萄糖醛酸酶

4.5U/mL，芳基硫酸酯酶14U/mL，或相当者。

5.2溶液的配制

5.2.1乙酸铵溶液：取乙酸铵3.85g，加水溶解并稀释至约900mL，用乙酸调节pH至4.8，加水定容至1000mL，混匀。

5.2.210%碳酸钠溶液：取碳酸钠50g，加水450mL使其完全溶解。

5.2.3乙腈-水-甲酸(95：5：0.5，v/v/v)：取乙腈950mL、水50mL和甲酸5mL，混匀。

5.2.4正己烷丙酮混合溶液：取300mL正己烷、200mL丙酮，混匀。

5.3标准品

地塞米松、倍他米松、地塞米松-D4和倍他米松-D5，纯度不低于98%，见附录A。

5.4标准溶液的制备

5.4.1标准储备液（1mg/mL）：取地塞米松和倍他米松标准品各约10mg，精密称定，分别加乙腈适量使溶解并稀释至10mL棕色容量瓶，配制成浓度为1mg/mL的标准储备液。-18℃以下避光保存，有效期6个月。

5.4.2同位素内标标准储备液（100μg/mL）：取地塞米松-D4和倍他米松-D5各约1mg，精密称定，分别加乙腈适量使溶解并稀释至10mL棕色容量瓶，配制成浓度为100μg/mL的同位素内标标准储备液。-18℃以下避光保存，有效期6个月。

5.4.3混合标准储备液（100μg/mL）：分别准确移取标准储备液各1.0mL，于10mL棕色容量瓶中，用乙腈稀释至刻度。-18℃以下避光保存，有效期6个月。

5.4.4混合内标标准储备液（50μg/mL）：分别准确移取同位素内标标准储备液各5.0mL，于10mL棕色容量瓶中。-18℃以下避光保存，有效期6个月。

5.4.5混合标准中间液：准确移取混合标准储备液0.1mL于10mL棕色量瓶中，用乙腈稀释至刻度。该溶液中各标准品浓度为1.0μg/mL。现用现配。

5.4.6混合内标标准工作液：准确移取混合内标标准储备液0.1mL于50mL棕色量瓶中，用乙腈稀释至刻度。该溶液中各内标浓度为100μg/L。现用现配。

5.4.7混合系列标准工作液：准确移取混合标准工作液、混合内标工作液适量，用流动相稀释成浓度为0.5、1.0、2.5、10、25和50μg/L的系列标准工作溶液，每一标准工作溶液含各内标浓度均为10μg/L。现用现配。

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5.5材料

5.5.1硅胶固相萃取小柱：500mg，3mL，或相当者。

5.5.2微孔滤膜：0.22μm，有机系。

6仪器和设备

6.1液相色谱串联质谱仪：配电喷雾离子源。

6.2分析天平：感量0.00001g和0.01g。

6.3匀质器。

6.4氮吹