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- 2025-06-04 发布于四川
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基因工程的基本操作程序
基因工程基本操作的四个步骤:目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定
目的基因的获取目的基因的来源从自然界已有的物种分离人工方法合成获取目的基因的常用方法从基因文库中直接获取如果需要大量的目的基因,需要对目的基因进行PCR技术扩增
从特定组织提取的染色体基因组DNA--基因组DNA文库(总)mRNA反转录成的cDNA拷贝----cDNA文库(部分)基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下,便于获得所需的目的基因。基因文库的分类(一)从基因文库中直接获取按照外源DNA片段的来源:
限制酶基因组DNA基因重组基因组文库体外包装转化细菌(一)从基因文库中直接获取
基因重组01cDNA02基因文库mRNA03部分基因文库反转录酶04(一)从基因文库中直接获取
利用PCR扩增目的基因过程高温变性(解旋为单链)低温退火(引物与单链互补结合)适温延伸(在Taq酶的作用下合成与模板互补的DNA双链)重复循环
利用PCR扩增目的基因过程
利用PCR扩增目的基因引物结果耐高温2n已知基因的核苷酸序列、四种脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶适宜的温度和PH值2、条件01使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增3、方式:以指数方式扩增,即____(n为扩增循环的次数)02
构建过程1目的基因启动子终止子标记基因复制原点2想一想:其中有两个DNA
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