聚苯乙烯微纳塑料对典型微生物间.pdf

摘要

摘要

抗生素和抗性基因（Antibioticresistancegenes，ARGs）的污染日益严

重，ARGs在环境中的传播进化会导致多重耐药细菌甚至是超级细菌的产生，

严重威胁生态系统的健康，包括人类健康。微纳塑料污染引起了广泛关注，

其中，聚苯乙烯（PS）在环境中被广泛检出。微纳塑料和ARGs往往共存

于自然和人工环境中，且可能存在相互作用。环境中抗性基因的传播主要通

过移动遗传元件的水平基因转移（Horizontalgenetransfer，HGT）实现。已

经有证据证明PS微纳塑料可以影响外源ARGs通过转化作用进入细菌体内

介导耐药基因传播，然而实际环境中接合作用是更有可能发生的HGT方

式。亟需研究接合体系中微纳塑料对ARGs的影响及机制，为控制实际环

境中微纳塑料介导的耐药基因传播风险提供理论支撑。

针对系统发育距离是否会影响微塑料对ARGs传播的问题，本研究揭

示了接合体系中微生物间的系统发育距离对ARGs传播的影响。供体菌为

EscherichiacoliLE392（含RP4质粒，四环素、卡那霉素、氨苄青霉素抗

性），属内受体菌为E.coliBL21(DE3)（氯霉素抗性），属间受体菌为

PseudomonasputidaKT2440（氯霉素抗性）。接合实验结果表明，属内接

合频率（5.28×10-6）是属间接合频率（4.45×10-8）的100多倍。通过对供

受体活性氧（Reactiveoxygenspecies，ROS）产量、细胞膜通透性和ATP

产量等生理生化指标，转录组学数据等基因表达信息的分析，阐明了属内接

合体系中微生物的ROS产生量和细胞膜通透性高于属间接合体系，对于

ARGs在系统发育距离相近的微生物间传播起到重要作用。

为了阐明微纳塑料不同尺寸对耐药基因传播的影响，研究了PS微纳塑

料不同粒径（20nm、120nm和1μm）对ARGs在属内和属间传播的影响

及机制。通过对生理生化指标和转录组学数据进行分析，明晰了PS微纳塑

料粒径影响耐药基因传播的机制。研究发现，20nmPS可促进微生物产生

ROS，增大细胞膜通透性，生成并利用更多的ATP，并相应地上调接合相

关基因的表达，显著促进了属间接合（接合频率4.73×10-7）；120nmPS对

属内和属间接合的影响没有其它两粒径大（1.78×10-5和7.94×10-8），原因

可能是其对供受体生理状态的影响弱于其它两种粒径；1μmPS显著促进了

供体中ATP的产生，并上调了菌毛通道形成相关基因的表达，增强了

ARGs的属内接合（接合频率5.7×10-5）。

为了进一步揭示微纳塑料不同浓度对耐药基因传播的影响，探明了PS

-I-

摘要

微纳塑料的浓度对耐药基因传播的影响。结果表明，随着浓度的增加，转移

频率呈现先增加后减少的趋势。0.1和1mg/LPS微纳塑料等环境相关浓度

显著促进了ARGs的转移传播。通过对接合频率、供受体氧化应激水平、

细胞膜通透性、以及接合相关基因的表达水平进行分析，PS微纳塑料促进

了活性氧（特别是单线态氧和羟基自由基