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STR简易操作说明

提取细胞DNA；

以细胞DNA提取物为模板PCR，每个细胞样品都需检测10个STR位点，分别为Amelogenin,CSF1PO,D13S317,D16S539,D5S818,TPOX,D7S820,D21S11,TH01,vWA，与之对应的有10对引物，其中一条有荧光标记；

PCR反响体系：

1×体系

10×体系

ddH2O

33.3

333

5×Buffer

10

100

2.5mMdNTP

4

40

引物1

1

10

引物2

1

10

模板

0.2

X*

Taq酶

0.5

5

50μl

498μl

说明：大体系混好后96孔板每孔分49.8μl，X指9个细胞样品分别加0.2μl，96孔板的具体分布参考下列图。

PCR反响条件：

1Cycle

35Cycles

1Cycle

1Cycle

95℃

95℃

58℃

72℃

72℃

16℃

5min

30sec

30sec

30sec

8min

∞

每个PCR样品取5ul加Loading电泳检测，勿直接往96孔板中加Loading；

电泳确认每个样品都有条带后送测基康生物；

信息查询与结果比对。

翻开ATCC网站，查询各细胞STR分型数据，以细胞Saos-2为例，搜索结果见下列图；

Fig.1

翻开该株细胞链接，选择SPECIFICATIONS即可看到该株细胞的