DB43_T 1936-2020 饲料中黄曲霉毒素B1快速检测 超导量点免疫荧光法.docxVIP

ICS65.020.20CCSB35

DB43

湖南省地方标准

DB43/T1936—2020

饲料中黄曲霉毒素B1快速检测

超导量点免疫荧光法

DetectionofaflatoxinB1infeedRapidquantitativemethodofsuperconductingdotsimmunofluorescencetechnique

2020-12-29发布2021-03-29实施

湖南省市场监督管理局发布

DB43/T1936—2020

I

目次

前言 Ⅲ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3原理 1

4试剂与材料 1

5仪器与设备 1

6样品制备 2

7上机测定 2

8结果表述 2

9重复性 2

附录A（规范性）超导量点免疫荧光快速定量检测卡性能评价要求 3

DB43/T1936—2020

III

前言

本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由湖南省农业农村厅提出。

本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：湖南省兽药饲料监察所、湖南九鼎科技（集团）有限公司、湖南省饲料工业协会。

本文件主要起草人：黄勇、李裕、李艳平、刘芬、张敏、雷加、周灿、曹霞。

DB43/T1936—2020

1

饲料中黄曲霉毒素B1快速检测超导量点免疫荧光法

1范围

本文件规定了饲料中黄曲霉毒素B1的超导量点免疫荧光测定方法的原理、试剂与材料、仪器与设备、样品制备、上机测定与结果表述。

本文件适用于我省植物性饲料原料、配合饲料、浓缩饲料中黄曲霉毒素B1的快速检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3原理

本方法基于超导量点标记的抗原抗体反应，采用荧光侧向免疫层析方法学原理。试样提取液中的黄曲霉毒素B1与检测卡上标记的抗体相结合并发出荧光，荧光强度与试样中黄曲霉毒素B1含量相关。层析结束后，用免疫荧光分析仪测定检测卡上的检测线和控制线的荧光强度，仪器根据内置标准曲线自动算出试样中黄曲霉毒素B1的含量。

4试剂与材料

4.1除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682中三级水的要求。

4.2稀释缓冲液：由超导量点免疫荧光定量检测卡配套提供，或根据产品使用说明书配制。

4.3提取液：量取550mL甲醇加入450mL水中，混匀。

5仪器与设备

5.1天平：感量0.01g。

5.2粉碎机：粉碎后全部通过20目分析筛。

5.3离心机：转速≥4000r/min。

5.4涡旋振荡器。

5.5检测卡：储存条件参照使用说明；技术指标应符合附录A要求。

5.6免疫荧光分析仪：可测定并显示检测卡的测定结果。

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2

5.7滤纸：采用中速定量滤纸。

5.8计时器。

6样品制备

6.1采样按GB/T14699.1的规定执行。

6.2样品处理

6.2.1试样制备按GB/T20195的规定执行。用粉碎机（5.2）粉碎至全部通过20目分析筛。

6.2.2称取5g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入25.0mL试样提取液（4.3），用涡旋振荡器（5.4）振荡10min；静置后用滤纸（5.7）过滤，或取1.0mL～1.5mL混合液于离心管中，经离心机（5.3）以4000r/min离心3～5min。取滤液或离心后的上清液100μL于另一洁净离心管中，加入400μL稀释缓冲液（4.2），充分混匀待测。

注：黄曲霉毒素B1超导量点免疫荧光定量检测卡所用的样品处理方法可能不同，应按照产品使用说明中规定的方法进行操作。

7上机测定

7.1开启免疫荧光分析仪（5.6）。

7.2将检测卡（5.5）取出，加样孔朝上平放。

7.3准确移取75μL待测液（6.2