植物组织培养实用技术.ppt

龙牙百合属百合科、百合属、百合种，药食兼用，是上等的滋补佳品，栽培经济效益好。百合繁殖方法主要有分球繁殖、鳞心繁殖、鳞片繁殖等，但经多代无性繁殖以后，导致病毒积累、种性退化，严重地制约着百合产量和质量的提高。利用组织培养与脱毒技术相结合，能够迅速去除无性繁殖体内病毒，复壮品种，并可加快百合的快速繁殖速度。第31页，共59页，星期日，2025年，2月5日龙牙百合特征:鳞茎，无皮，广卵形，外部鳞片长,将整个鳞茎包裹，直径5~15厘米，白色，茎高90厘米左右，直立茎上叶多而散生，披针形，叶色从浓绿，光滑。花单生茎顶。花朵呈喇叭状长筒形，白色，有清香。第32页，共59页，星期日，2025年，2月5日一、外植体的选择龙牙百合的许多器官、组织都可作为外植体，如鳞片、花梗、叶片、茎尖、腋芽、花瓣、花托、花丝、花药、胚、子房、根尖等，其中采用鳞片作外植体的较多。第33页，共59页，星期日，2025年，2月5日以鳞片为例，在选取外植体时，要选择具备龙牙百合品种特征、无病虫害危害的种球。外部鳞片易污染要将其剥离，中部鳞片肉质厚，生长势强，易诱导小鳞茎，是最佳的外植体。内部鳞片幼嫩，诱导率低，不易产生小鳞茎，故不宜采用。就季节性而言，以秋、冬季的鳞片分化成小鳞茎的能力最强，第34页，共59页，星期日，2025年，2月5日二、外植体的消毒由于龙牙百合鳞茎都生长在土中，受土壤微生物的影响，所以一般都会有污染。为此外植体消毒要严加注意，鳞片先用流线形自来水冲洗12小时以上进行预灭菌第35页，共59页，星期日，2025年，2月5日再用70%酒精消毒1min，用0.1%升汞消毒10min第36页，共59页，星期日，2025年，2月5日最后用无菌水冲洗4~6次，用无菌吸水纸吸干水分。第37页，共59页，星期日，2025年，2月5日三、外植体的原代培养在同一块鳞片上，其中部被诱导产生小鳞茎的能力最强，诱导出的小鳞茎生长速度也相对较快，而两头位置相对要差些，所以在进行原代培养时，要取已消毒外植体的中部第38页，共59页，星期日，2025年，2月5日将其切成1~2cm2大小，背部朝下置于MS+NAA0.03mg/kg+琼脂0.7%+蔗糖3%培养基上培养。第39页，共59页，星期日，2025年，2月5日培养条件为：温度控制在23±2℃，光照控制在300~500Lx进行脱分化，之后温度控制在25±2℃，每天10h小时1500Lx光照。第40页，共59页，星期日，2025年，2月5日在龙牙百合组织培养过程中，鳞片诱导产生小鳞茎的过程是比较缓慢的，一般为30天以上，在鳞片上分化出多个肉眼可见的针尖大小的小突起。第41页，共59页，星期日，2025年，2月5日40天左右发育成球状的可见鳞片的小鳞茎。第42页，共59页，星期日，2025年，2月5日关于植物组织培养实用技术第1页，共59页，星期日，2025年，2月5日花卉组织培养实用技术(以非洲菊为例)非洲菊组织培养技术第2页，共59页，星期日，2025年，2月5日非洲菊属多年生草本花卉。重瓣花，花色有红、橙红、淡红、白色，花色艳丽，可用作切花生产或盆栽观赏。第3页，共59页，星期日，2025年，2月5日传统的繁殖方法为播种或分株繁殖，但非洲菊种子寿命短、发芽率低，而且播种繁殖变异率很高，难以得到性状一致的种苗，因而不能用于规模生产；而分株繁殖则存在繁殖慢，易退化和传播病害，也不适于现代的大规模生产，因而目前国外一般都采用组织培养的方法来生产种苗。第4页，共59页，星期日，2025年，2月5日一．外植体的选择1、文献资料综述茎尖是一种较好的外植体，出愈率最高、繁殖速度快，但取材有限、灭菌很易产生药害。幼叶、幼叶柄、花梗作为外植体，可诱导产生愈伤组织，但是诱导成苗难。花托是非洲菊组织培养中比较理想的外植体，其好处在于花托较大，易于剥取，并有花被包裏，污染程度轻，易于消毒，污染率低第5页，共59页，星期日，2025年，2月5日首先要选择花大、花色艳丽、市场流行的品种，然后再选择无病虫害、植株生长健壮、花色纯正的优良品种单株进行取材。作为外植体的花蕾要选取直径在1.0cm左右，而且未露心的小花蕾，太大或是太小的花蕾均不能获得满意的效果。2外植体的选择方法第6页，共59页，星期日，2025年，2月5日二．外植体的消毒方法11、剥去外层萼片，在自来水下冲洗干净2、置0.15%的升汞溶液中浸泡12~15分钟3、取出后剥去外部所有萼片,在1%的次氯酸钠溶液中消毒10分钟4、放入无菌水中充分洗涤3次方法21、剥去外层萼片，在自来水下冲洗干净2、置70%