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pcr考试试题及答案填空题

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的发明者是（）

A.沃森

B.克里克

C.穆利斯

D.富兰克林

答案：C

2.PCR反应中，哪种酶起到关键作用（）

A.限制酶

B.连接酶

C.Taq酶

D.解旋酶

答案：C

3.PCR反应的第一步是（）

A.退火

B.延伸

C.变性

D.终止

答案：C

4.在标准的PCR反应体系中，引物的浓度一般为（）

A.0.1-0.5μM

B.1-5μM

C.10-50μM

D.100-500μM

答案：A

5.PCR反应中，退火温度主要取决于（）

A.模板长度

B.引物的长度和GC含量

C.酶的活性

D.dNTP的浓度

答案：B

6.以下哪种物质不是PCR反应的基本成分（）

A.模板DNA

B.RNA聚合酶

C.dNTP

D.引物

答案：B

7.PCR产物的特异性取决于（）

A.模板纯度

B.引物特异性

C.酶的活性

D.反应温度

答案：B

8.进行PCR反应时，如果没有得到预期的产物，可能的原因不包括（）

A.引物设计错误

B.模板浓度过高

C.反应体系中存在抑制物

D.反应温度过高且持续时间过长

答案：D

9.一个典型的PCR反应循环次数一般为（）

A.10-15次

B.15-20次

C.20-30次

D.30-40次

答案：C

10.PCR反应中，dNTP的作用是（）

A.提供能量

B.构建新的DNA链

C.解开双链

D.稳定反应体系

答案：B

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术在以下哪些领域有应用（）

A.基因诊断

B.法医学鉴定

C.古生物学研究

D.基因克隆

答案：ABCD

2.影响PCR反应效率的因素包括（）

A.引物质量

B.模板质量

C.酶的活性

D.反应体系的pH值

答案：ABCD

3.以下关于引物设计的原则正确的是（）

A.长度适中

B.GC含量合适

C.避免引物自身二级结构

D.引物之间不能互补

答案：ABCD

4.PCR反应中，以下哪些操作可能导致非特异性扩增（）

A.引物浓度过高

B.退火温度过低

C.模板纯度低

D.循环次数过多

答案：ABCD

5.在进行PCR反应时，为了提高反应的特异性可以采取的措施有（）

A.优化引物设计

B.提高退火温度

C.降低引物浓度

D.提高模板纯度

答案：ABCD

6.以下哪些是PCR反应的特点（）

A.特异性强

B.灵敏度高

C.操作简便

D.快速

答案：ABCD

7.PCR反应体系中可能包含的缓冲液成分有（）

A.Tris-HCl

B.KCl

C.MgCl?

D.NaCl

答案：ABC

8.以下关于Taq酶的特性正确的是（）

A.耐高温

B.具有5-3聚合酶活性

C.具有3-5外切酶活性

D.催化dNTP合成DNA

答案：ABD

9.如果PCR反应后电泳结果出现多条带，可能的原因有（）

A.引物特异性差

B.模板存在多种序列

C.反应体系污染

D.退火温度不合适

答案：ABCD

10.在PCR反应的延伸阶段，主要发生的反应是（）

A.以引物为起点合成新的DNA链

B.模板DNA解链

C.引物与模板结合

D.去除错误掺入的dNTP

答案：A

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应可以在常温下进行。（）

答案：错误

2.引物在PCR反应中可以无限次使用。（）

答案：错误

3.只要有足够的酶，PCR反应就可以无限循环。（）

答案：错误

4.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）

答案：错误

5.PCR反应中，模板DNA可以是单链也可以是双链。（）

答案：正确

6.提高退火温度一定会提高PCR反应的特异性。（）

答案：错误

7.在PCR反应中，dNTP的浓度越高越好。（）

答案：错误

8.引物长度越长，PCR反应的特异性就越高。（）

答案：错误

9.如果PCR反应体系中没有模板DNA，就不会有任何产物。（）

答案：正确

10.PCR反应中，延伸时间越长，产物的长度就越长。（）

答案：错误

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

答案：PCR反应基于DNA的半保留复制原理。在高温下，模板DNA变性解链为单链；退火时，引物与单链模板特异性结合；延伸阶段，在Taq酶作用下，以dNTP为原料，从引物的3端开始合成新的DNA链。经过多次循环，目的DNA片段得到大