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- 2025-06-10 发布于四川
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埃及血吸虫核酸检测重组酶介导等温扩增法
埃及血吸虫(Schistosomahaematobium)隶属于吸虫纲、裂体科、血吸虫属,是寄生在人体的5种血吸虫之一,主要流行于非洲、亚洲西部和中东地区,通过影响中间宿主椎实螺的传播,可引起泌尿系统病变等一系列严重的健康问题。传统的病原学诊断方法如尿液离心沉淀镜检虫卵存在灵敏度低等不足,血清学方法则存在交叉反应等问题。重组酶介导等温扩增(Recombinase-mediatedisothermalamplification,RMA)技术是一种新型的核酸扩增技术,其特点是能在等温条件下快速、高效地扩增特定核酸片段,为埃及血吸虫的检测提供了新的手段。
原理
RMA技术模拟了细胞内DNA复制的起始阶段。重组酶、单链结合蛋白和引物形成复合物,该复合物能特异性地识别并结合到与之互补的靶DNA序列上。一旦结合,在解旋酶的作用下,局部DNA双链解旋,引物启动DNA合成,并在DNA聚合酶的作用下沿着模板链延伸。反应过程无需热循环,可在37-42℃的等温条件下进行,快速实现核酸的大量扩增。对于埃及血吸虫核酸检测,就是利用特异性引物来识别埃及血吸虫基因组中的独特序列,在适宜的反应体系和条件下对其核酸进行扩增和检测。
材料与试剂准备
样本采集
-尿液样本
-收集疑似感染埃及血吸虫患者的中段晨尿约30-50mL,因为晨尿中
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