蛋白质工程的原理和应用课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第4节蛋白质工程的原理和应用;

任务一：探索速效胰岛素合成过程，归纳蛋白质工程的思路;

【资料】1978年，科学家利用基因工程技术，生产出首个与人胰岛素序列完全相同的胰岛素产品。1982年，第1种重组人胰岛素获得批准。人胰岛素逐渐取代动物胰岛素被应用于临床。天然胰岛素见效慢，是因为天然胰岛素制剂往往以二聚体或六聚体的形式存在，需要经历长时间才能解离为单体，发挥作用。;

思考1:

(2)基因工程的实质?

将一种生物的基因转移到另一种生物体内，后者可以产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新性状。

(3)利用基因工程技术能生产出见效较快的胰岛素吗?只能生产自然界已存在的蛋白质

(4)如何才能生产出速效胰岛素，满足人类的需求?;

GLyLIe(ValGluGLnCysCysThr(SerLleCysSerLeuTyrGlnLeuGluAsnTyrCysAsn

1015

S

B链

Tyr(LeuVal

Gly20

Glu

胰岛素的分子结构示意图

Gly

Thr((LysFPr

六聚体脯氨酸

天冬氨酸

单体;

速效胰岛素基因部分碱基序列

TATACTAAGCcCACC

ATATGATTCGGGTGG

转录

UAUACUAAGcCCACCmRNA;

思考2:(3)改造天然胰岛素(蛋白质)的思路是什么?

①预期蛋白质的功能④找到并改变相对应的脱氧核苷酸

②设计预期的蛋白质结构序列(基因)或合成新的基因

③推测应有的氨基酸序列⑤获得所需蛋白质

(4)确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因?

基因较短——人工合成目的基因

或应用基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等进而改造基因。;

常规下游引物

拟突变位点

———3————5

53

突变上游引物

进行PCR

5一

产物作为下一轮PCR的大引物3←

下游大引物

———5

35

常规上游引物

3

一5;

重叠延伸PCR技术进行定点突变：;

推测氨基酸序列

B28位脯氨酸替

换为天冬氨酸

折叠

多肽链

有效抑制胰岛

素的聚合;;

思考4:如何确定一个操作过程是基因工??技术还是蛋白质工程技术?

蛋白质工程

是

是否对原有基因

进行改造

否

基因工程

是否为天然

蛋白质

蛋白质工程;

比较项目;

任务二：应用蛋白质工程思路解决实际问题;

思考5:

(1)科学家利用了什么技术让细菌能发出绿色荧光?

基因工程技术使细菌表达了绿色荧光蛋白。

(2)科学家改造绿色荧光蛋白运用了什么原理?

(3)说出改造绿色荧光蛋白的思路?;

丙氨酸色氨酸赖氨酸谷氨酸

思考6:

(1)怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?

请写出相应的碱基序列。查密码子表;

第一个

碱基;

丙氨酸;

思考6:(3)确定目的基因的碱基序列后，怎样才能改造目的基因。

人工合成目的基因

从基因文库中获取目的基因。

基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等。;

【资料】干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被

广泛用于治疗病毒感染性疾病，但在体外保存却相当困难。;

HH人鼠嵌合抗体

鼠抗体

H

人抗体L:轻链

H:重链

图1-1-22

嵌合抗体的合成示意图;

应用;

2.前景展望

科学家要设计出更加符合人类需要的蛋白

质，还需要不断地攻坚克难。随着科技的深入发展，蛋白质工程将会给人类带来更多的福祉。;

T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，但是它在温度较高时容易失去活性。

为了提高T4溶菌酶的耐热性，科学家首先对影响T4溶菌酶耐热性的一些重要结构进行了研究。然后以此为依据对相关基因进行改造，使T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸。于是，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，T4溶菌酶的耐热性得到了提高。

1.这项工作属于什么工程的范畴?蛋白质工程

2.在该实例中引起T4溶菌酶空间结构发生改变的根本原因是什么?根本原因：基