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第五章凝集反应

细菌、红细胞等颗粒抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体

（或抗原）在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应。

第一节凝集反应的特点

凝集试验是一个定性的检测方法，即根据凝集现象的出现与否判定结果阴性或阳性；

也可进行半定量检测，即将抗体作一系列稀释，与抗原结合产生凝集的最高稀释倍数作为其效价或滴

度。

凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合；②出现可见的颗粒凝聚。

第二节直接凝集反应

一、原理

细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。参加

凝集反应的抗原称凝集原，抗体则称为凝集素。

二、方法

有玻片法和试管法两类。

（一）玻片凝集试验主要用于抗原的定性分析，短时间便能观察结果。

一般用来鉴定菌种或分型；也用于人类ABO血型的测定。

（二）试管凝集试验是用定量抗原悬液与一系列梯度倍比稀释的待检血清混合，保温静置后，根据每

管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有无相应抗体及其效价。

可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。例如肥达试验、外斐试验、输血时也常用于受体和供体

两者间的交叉配血试验。

第三节间接凝集反应

一、原理

间接凝集反应是将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，然后与相应抗体（或

抗原）作用，在适宜电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象。

二、间接凝集反应的类型

（一）正向间接凝集反应可溶性抗原致敏载体，用以检测标本中待测抗体的凝集反应，称为正向间接

凝集反应。

（二）反向间接凝集反应特异性抗体致敏载体，用以检测标本中待测抗原的凝集反应，称为反向间接

凝集反应。

（三）间接凝集抑制反应先将可溶性抗原（或抗体）与相应的抗体（或抗原）混合，然后再加入抗原

（或抗体）致敏的载体颗粒，则能抑制原先的凝集现象，称为正向（或反向）间接凝集抑制试验。间接凝

集抑制试验可用于检测抗体、自身抗体、变态反应性抗体，也可测定抗原。

（四）协同凝集反应协同凝集反应与间接凝集反应的原理相类似，但所用载体为金黄色葡萄球菌A蛋

白（SPA）。SPA具有与IgG的Fc段结合的特性，因此当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体致敏

的颗粒载体。如与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。协同凝集反应也适用于细菌的直接检测。

间接凝集反应适用于各种抗体和可溶性抗原的检测。以载体来分，常用的为红细胞、胶乳颗粒及明胶

颗粒等。

三、间接凝集反应的载体分类

（一）间接血凝试验

1.原理：抗原（或抗体）包被于红细胞表面，成为致敏载体，然后与相应的抗体（或抗原）结合，从

而使红细胞被动的凝聚在一起，出现可见的红细胞凝集现象。

2.载体：最常用的为绵羊、家兔、鸡的红细胞及O型人红细胞。

致敏的新鲜红细胞保存时间短，且易变脆、溶血和污染，只能使用2～3天。为此一般在致敏前先将红

细胞醛化，可长期保存而不溶血。常用的醛类有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。红细胞经醛化后体积略有增大，

两面突起呈圆盘状。

3.致敏：致敏用的抗原或抗体要求纯度高，并保持良好的免疫活性。

4.血凝试验：可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为1:64。凡红细胞沉积于，

集中呈一圆点的为不凝集（－）。如红细胞凝集，则分布于周围。以＋＋凝集（红细胞沉积于管底呈

环状，四周有凝集的小块）的滴度终点。

（二）胶乳凝集试验

载体为聚苯乙烯胶乳，是一种直径约为0.8μm大小的圆形颗粒，带有负电荷，可物理性吸附蛋白分子，

但这种结合牢固性差。

胶乳凝集试验分试管法和玻片法两种。

（三）明胶凝集试验

将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗