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分子生物学研究方法;PCR技术在医学中的应用;一.多聚酶链反应(PolymeraseChainReaciton,PCR)
（一）原理;;;;;;;二PCR的应用;;(二）利用PCR对基因功能进行分析和改造;(三）基因拼接;（四）Invitroevolutionofgene-codingprotein;DNAShuffle;
怎样提高高保真的重组体
1．在步骤2）使用Mn2+而不是Mg2+
2．在PCR步骤使用高保真的耐热DNA聚合酶;PCRRandomMutagenesis;怎样获得理想的突变率;2．突变偏向（mutationalbias)
评估方法：1）transition/transversion
Transition：嘌呤突变为嘌呤，嘧啶突变为嘧啶
Transversion:嘌呤突变为嘧啶
2）A或T转变为G或C的程度，或者是反过来
ATGC/GCAT
;（五）．基因表达及其调控的分析;;2,Chromatinimmunoprecipitation(ChIP)
主要应用:研究转录因子在体内与其顺式作用元件的结合
原理：;3.DNA甲基化的分析;谢谢大家！
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