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ICS65.020

B16

DB13

河北省地方标准

DB13/T2211—2015

马铃薯抗早疫病室内鉴定技术规范

Indooridentificationstandardofpotatovarietiesresistancetoearlyblight

2015-11-06发布2016-01-01实施

河北省质量技术监督局发布

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DB13/T2211—2015

前言

本标准按GB/T1.1-2009规定起草。

本标准由保定市质量技术监督局提出。

本标准起草单位：河北农业大学。

本标准主要起草人：杨志辉、朱杰华、杨毅清、张维宏、刘丽丽、何佳昱。

DB13/T2211—2015

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马铃薯抗早疫病室内鉴定技术规范

1范围

本标准规定了马铃薯品种（系）和种质资源对早疫病抗性的室内鉴定技术规程，包括马铃薯品种室内抗性鉴定方法、马铃薯品种（系）和种质资源对早疫病的抗病性分级标准及评价。

本标准适用于马铃薯品种（系）和种质资源对早疫病抗性室内鉴定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T496肥料合理使用准则通则

NY/T5222马铃薯生产技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

马铃薯早疫病potatoearlyblight

由茄链格孢（Alternariasolani）引起的马铃薯上的一种气流传播的真菌病害，主要为害马铃薯叶片，在叶片上形成具有同心轮纹的坏死斑，也可为害地上茎和薯块，形成坏死斑，该病发生程度与寄主生育期相关，主要表现为生育后期感病严重。

3.2

接种体Inoculum

用于人工接种而引起马铃薯早疫病的病原体，在本标准中指用于接种的茄链格孢分生孢子悬浮液。3.3

室内抗性鉴定Resistanceidentificationinlab

利用接种体对被鉴定材料叶片进行人工接种，创造病原菌侵染和发病所需的最佳温、湿度以及光照条件，通过对接种叶片发病程度的科学界定（病情分级）来评价被接种马铃薯对早疫病的抗性。

3.4

对照品种Controlvariety

用于室内鉴定试验中的马铃薯感病品种和抗病品种。

3.5

2

DB13/T2211—2015

脱毒马铃薯种薯Virus-freeseedpotato

除去马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯A病毒（PVA）和马铃薯卷叶病毒（PLRV）等主要病毒的马铃薯种薯。

3.6

病斑特征Lesionfeature

被接种叶片发病后在不同马铃薯材料上的特异性表现。

3.7

病斑直径Lesiondiameter

采用十字交叉法测定病斑的长度和宽度之和的平均值。

4室内抗性鉴定方法

4.1对照品种的选择

选择对不同地区适应性强、抗性程度已知的脱毒马铃薯作为室内抗性鉴定的对照品种。对照品种包括一个生产中主栽的感病品种费乌瑞它和一个马铃薯抗性测定单位提供的参考对照品种。

4.2栽培及管理

被测马铃薯品种（系）、种质资源按NY/T5222要求进行田间种植；施肥按照NY/T496要求进行。

4.3叶片采集时间及要求

待马铃薯生长至块茎膨大期时采集叶片，采集植株中下部大小一致（宽度约为3cm），且无孔洞、无病斑的健康叶片，装入密封袋带回室内。

4.4接种前器皿及叶片的准备

将含有10.5μmol/L萘乙酸（NAA）和10μg/mL盐酸四环素的0.5%水琼脂倒入灭菌玻璃皿（d=15cm）中，待琼脂凝固后，将被测叶片叶柄插入水琼脂中，保持叶片正面朝上以备接种。

4.5接种体菌株的选择

选择采自河北省不同地区、产孢量大、致病力强的5个菌株作为早疫病抗性鉴定的菌株组合。

4.6接种体的制备

将选择的早疫病菌菌株活化后接种到番茄汁培养基（番茄125g，琼脂粉5g，补充蒸馏水至1000mL）中，25℃黑暗培养7d，然后用无菌水冲洗，刮除菌丝，在紫外光下照射5min～10min，20℃培养3d，再用无菌水冲洗分生孢子，将分生孢子悬浮液浓度调整到1×105个/mL，备用。

4.7接种方法

采用微量移液器准确量取4.6所制备的分生孢子悬浮液25μL，利用悬滴法接种到叶片正面中部的主脉附近，每个品种（系）或种质资源重复接种10个叶片。

4.8接种叶片的培养

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