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原代细胞的获取与培养;目录;玻璃器皿
金属器械
橡胶制品
塑料制品
布类制品;动物细胞培养用品;玻璃器皿;金属器械;橡胶制品;;;塑料制品;布类制品;培养用品的清洗
培养用品的包装;培养用品的清洗和消毒程序;清洗;金属器械的清洗
清水浸泡10min→放到含洗涤剂的水中刷洗干净→自来水冲洗干净→甩干→用75%酒精棉球擦拭→自来水冲洗干净→最后三蒸水浸洗3次,晾干或50℃烘干备用。
正压除菌滤器的清洗
含稀洗涤剂的水中,反复刷洗后→流水冲洗15min
→漓水→蒸馏水浸泡过夜→三蒸水浸泡过夜→晾干或50℃烘干备用。;包装;包装时应注意:手指与器材接触面积要小,手指不能触及器材的使用端;封闭器材使用端,标记器材手持端;小包装;玻璃管道口(尖吸管、移液管手持端等)加棉花。;清洗;常用消毒灭菌的方法;常用的化学消毒剂;平衡盐溶液(BSS)
消化液
培养基(液);平衡盐溶液(BSS);平衡盐溶液(BSS);;;培养基(液);动物细胞的原代培养定义
组织块培养法
消化培养法
细胞计数;;;组织块培养法基本流程如何?;1.接种组织块;2.移入培养箱中(注意贴有组织块的一面朝上);污染;消化培养法定义;WHATMAKESUSDIFFERENT?
WehavemanyPowerPointtemplatesthathasbeenspecificallydesignedtohelpanyonethatissteppingintotheworldofPowerPointfortheveryfirsttime.;人工显微镜计数法;细胞计数;;①加盖玻片,盖住两边的小槽。
②充液:用滴管或者移液器将一小滴震荡混匀的稀释的细胞悬液滴在盖玻片边缘的玻片上,细胞悬液借毛细管现象自动渗入计数室中。
③避免滴入过多细胞悬液,溢出并流入两侧槽内,使盖玻片浮起。
④避免滴入过少细胞悬液,易产生气泡。;①计数区每个中方格内16个小方格要依次计数遵循S形计数原则。
②在计数靠近中方格边线(为双线)的细胞时,遵循“计上不计下,计左不计右”原则。
③如发现各中方格中的细胞数目相差20个以上表明细胞分布不均匀,须重新计数。;含有两个室,每个室被划分为9个方阵,其中4个方阵有16
个小方格,为0.1mm3或1x10–4ml。;感谢聆听
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